2013 Fiscal Year Research-status Report
iPS細胞誘導技術を駆使した哺乳類新型多能性幹細胞株の樹立
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25871115
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Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Research Institution | Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
築山 智之 独立行政法人理化学研究所, 発生・再生科学総合研究センター, 研究員 (60612132)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 異種間キメラ / 新型多能性幹細胞 / INTPS細胞 / ラットiPS細胞 |
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| Research Abstract |
piggyBac遺伝子導入系を用い、外来性リプログラミング因子の発現をドキシサイクリンの添加の有無によって任意に制御可能としたポリシストロニックカセット(TET-ONリプログラミング因子)と、樹立した細胞の多能性・キメラ貢献能・生殖細胞寄与能を評価するための蛍光レポーター(EOSレポーター、RFPレポーター、Acrosinレポーター)を体細胞に導入して iPS細胞を誘導する動物種を問わないユニバーサルな培養条件評価系を開発し、129B6F1系統および従来ES細胞株を得ることが困難であったNOD系統由来マウス胎仔線維芽細胞、およびラット胎仔線維芽細胞から、従来の培養条件を用いて生殖細胞寄与能を持つマウスおよびラットiPS細胞を樹立できることを示した。(Tsukiyama T. et al.,2014, PLoS ONE, 9(3): e92973)なお、この論文はマウス-ラット異種間キメラ内でラットiPS細胞由来の機能的なラット生殖細胞を作出した最初の報告であり、蛍光レポーターの発現によって非侵襲的にキメラ貢献能、生殖細胞寄与能を評価できる実験系の有用性が示された。
さらに、GSK3阻害剤を含むエピブラスト幹細胞培養条件を用いてES細胞を培養すると、ES細胞とエピブラスト幹細胞の中間の性質を示す新規の多能性状態に安定化することを見出した。Intermediate Pluripotent Stem Cell(INTPS細胞)と名付けられたこれらの細胞は、上記の実験系により、キメラ貢献能、生殖細胞寄与能を有することが示された。この培養条件はLIFシグナリングに依存せずに多能性を維持することができ、非齧歯類における新規多能性幹細胞株を樹立する上で有用である可能性があり、論文として報告した。(Tsukiyama T. et al., 2014, PLoS ONE, in press)
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
交付申請書に記載した研究実施計画の通り、培養条件評価系を開発し、従来報告がない新規の培養条件を見出したことからおおむね順調に進展していると考える。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度より所属が滋賀医科大学動物生命科学研究センターに変更となる。滋賀医科大学動物生命科学研究センターはカニクイザルを用いて発生工学的研究ができる国内唯一、世界でも数少ない研究機関である。このアドバンテージをフルに活かし、サルにおける遺伝子改変動物の作製、多能性幹細胞株の樹立を行う。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
平成26年度より滋賀医科大学動物生命科学研究センターに転出することが前年度途中に決まり、研究のセットアップのための資金が必要と考え、平成26年度に多く研究資金が配分されるように前年度の支出を控えた。
本年度より所属が滋賀医科大学動物生命科学研究センターに変更となる。滋賀医科大学動物生命科学研究センターはカニクイザルを用いて発生工学的研究ができる国内唯一、世界でも数少ない研究機関である。このアドバンテージをフルに活かし、サルにおける遺伝子改変動物の作製、多能性幹細胞株の樹立を行う。
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