2014 Fiscal Year Annual Research Report
iPS細胞誘導技術を駆使した哺乳類新型多能性幹細胞株の樹立
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25871115
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
築山 智之 滋賀医科大学, 動物生命科学研究センター, 助教 (60612132)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 異種間キメラ / 新型多能性幹細胞 / INTPS細胞 / ラットiPS細胞 / TS細胞 / トランスポゾン / piggyBac |
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| Outline of Annual Research Achievements |
piggyBac遺伝子導入系を用い、外来性リプログラミング因子の発現をドキシサイクリンの添加の有無によって任意に制御可能としたポリシストロニックカセットと、樹立した細胞の多能性・キメラ貢献能・生殖細胞寄与能を評価するための蛍光レポーターを体細胞に導入してiPS細胞を誘導する動物種を問わないユニバーサルな培養条件評価系を開発し、129B6F1系統および従来ES細胞株を得ることが困難であったNOD系統由来マウス胎仔線維芽細胞 、およびラット胎仔線維芽細胞から、生殖細胞寄与能を持つiPS細胞を樹立できることを示した上、マウス-ラット異種間キメラ内でラットiPS細胞由来の機能的なラット生殖細胞を世界で初めて作出し、蛍光レポーターの発現によって非侵襲的にキメラ貢献能、生殖細胞寄与能を評価できる実験系の有用性を示した。(Tsukiyama T. et al.,2014, PLoS ONE, 9(3): e92973)
また、GSK3阻害剤を含むエピブラスト幹細胞培養条件を用いてES細胞を培養すると、ES細胞とエピブラスト幹細胞の中間の性質を示す新規の多能性状態に安定化することを見出し、Intermediate Pluripotent Stem Cell(INTPS細胞)と名付けた。また、前述の実験系により、これらの細胞がキメラ貢献能、生殖細胞寄与能を有することを示した。この培養条件はLIFシグナリングに依存せずに多能性を維持することができ、非齧歯類における新規多能性幹細胞株を樹立する上で有用である可能性があり、論文として報告した。(Tsukiyama T. et al., 2014, PLoS ONE, 9(3): e95329)
さらに、ヒトiPS細胞の樹立および維持、カニクイザルES・iPS細胞の樹立および維持において、Wnt阻害剤であるXAV939が分化阻害に有効であることを見出した。これにより、従来は培養が煩雑で高度な手技が必要であったヒトやカニクイザルの多能性幹細胞の未分化維持培養が容易に行えるようになると考えられる。
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