2014 Fiscal Year Annual Research Report
味覚受容体T1Rに作用する機能性抗体の作製とその機能発現メカニズムの精密解析
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25891017
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
安井 典久 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (90467514)
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| Project Period (FY) |
2013-08-30 – 2015-03-31
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| Keywords | 抗体 / Fab断片 / 味覚受容体 / GPCR / 相互作用 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では，味覚受容体タンパク質の動作メカニズムの解明を見据えて，味覚受容体細胞外領域に対する機能性抗体の取得と，それらの性状解析を目的とする。味覚受容体と抗体の双方について，高品質のサンプルを調製し，それらの物理化学的性質と抗体の持つ分子機能とを丹念に調べ上げることが，本研究の特徴である。
前年度において，(1) モノクローナル抗体からのFab断片の調製と各種クロマトグラフィー法を用いた精製，(2) ゲルろ過クロマトグラフィーによるFab断片と味覚受容体細胞外領域の相互作用解析，を行った。
今年度は，前年度に確立した精製法を用いて，より大きなスケールで高い純度の精製Fab断片を調製した。結晶化を行うに十分な量のサンプルが得られ，味覚受容体細胞外断片との共結晶化を行った。また，前年度に引き続き，Fab断片と味覚受容体細胞外領域の相互作用を，ゲルろ過クロマトグラフィーにより解析した。エピトープのオーバーラップの有無を明らかにすることを目的に，同時に複数種類のFab断片を，味覚受容体細胞外断片と混合して解析した。合計5種類のFab断片について解析した結果，3種類のFab断片で，エピトープ領域が共通している可能性が考えられた。得られた情報は，今後，Fab断片の性状解析を進展させる上で有用である。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Directed network wiring identifies a key protein interaction in embryonic stem cell differentiation.2014
Author(s)
Yasui, N., Findlay, G.M., Gish, G.D., Hsiung, M.S., Huang, J., Tucholska, M., Taylor, L., Smith, L., Boldridge W.C., Koide, A., Pawson, T, Koide, S.
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Journal Title
Mol Cell
Volume: 54
Pages: 1034-1041
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] 人工タンパク質を用いた細胞内相互作用ネットワークの再構築によるマウスES細胞の分化に重要なタンパク質間相互作用の同定2014
Author(s)
安井 典久, Greg M. Findlay, Gerald Gish, Marilyn S. Hsiung, Jin Huang, Monika Tucholska, Lorne Taylor, Louis Smith, W. Clifford Boldridge, 小出 明子, Tony Pawson, 小出 昌平
Organizer
第37回分子生物学会年会
Place of Presentation
横浜
Year and Date
2014-11-26
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[Presentation] 特定の配列モチーフに単一特異的に結合する人工タンパク質の作製とその利用によるタンパク質間相互作用の機能アノテーション2014
Author(s)
安井 典久, Greg M. Findlay, Gerald Gish, Marilyn S. Hsiung, Jin Huang, Monika Tucholska, Lorne Taylor, Louis Smith, W. Clifford Boldridge, 小出 明子, Tony Pawson, 小出 昌平
Organizer
第14回日本蛋白質科学会年会
Place of Presentation
横浜
Year and Date
2014-06-26
Invited
