2014 Fiscal Year Annual Research Report

リプログラミング技術を用いたヒト型慢性骨髄単球性白血病マウスモデルの作成と解析

Research Project

Project/Area Number	25893048
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	田岡和城東京大学, 医学部附属病院, 助教 (30529178)
Project Period (FY)	2013-08-30 – 2015-03-31
Keywords	血液内科
Outline of Annual Research Achievements	本研究者は、慢性骨髄単球性白血病(CMMoL)患者よりエピゾーマルベクターを用いてOCT3/4、SOX2、KLF4、L-MYC、LIN28、p53-shRNAを導入し、CMMoL患者由来iPS細胞(CMMoL-iPSCs)を樹立した。患者検体と同様の染色体異常やEZH2変異、NRAS変異、RUNX1変異もiPS細胞でも確認された。CMMoL-iPSCs由来造血コロニーではCD34陽性の造血幹・前駆細胞、CD13陽性の骨髄系細胞の増加を認めた。更に、CMMoL-iPSCs由来血球は、コロニー形成のreplatingやサイトカインなしでの培養が可能であった。これらの結果は、CMMoL-iPS細胞由来血球が元のCMMoLCsの白血化能を反映していることを示していると考えられた。CMMoL-iPSCsをOP9細胞株とともにiPS細胞を免疫不全マウスの皮下に移植すると、形成された奇形腫内および骨髄内で造血幹・前駆細胞が生じた。テラトーマ内のCD34陽性CD45陽性の造血幹・前駆細胞を免疫不全マウスに2次移植したところ、CD13陽性の単球細胞やCD34陽性細胞の芽球が認められ、患者検体と同様のEZH2変異、NRAS変異、RUNX1変異を持っており、患者由来ヒト型CMML-iPSCs由来マウスモデルを作製した。この疾患iPS由来テラトーマを介したヒト化マウスモデルの手法は、CMMoL-iPSのみならず、その他の疾患由来iPSにも応用可能であり、汎用性があると考えられた。CMMoL-iPSCs由来血球は、ｐERKの活性化を来しており、RAS阻害剤やMEK阻害剤によるRAS/MEK/ERKシグナルの阻害により、増殖が阻害された。CMMoL-iPSCs由来血球を用いたRAS/MEK/ERKシグナルの制御が治療標的となる可能性が示唆された。
Research Progress Status	26年度が最終年度であるため、記入しない。
Strategy for Future Research Activity	26年度が最終年度であるため、記入しない。