歯周病性歯槽骨吸収に対する新規予防・治療法の開発を目指した基礎研究

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25893241
• Research Institution: Showa University
• Principal Investigator: 秋山 智人 昭和大学, 歯学部, 助教 (90710319)
• Project Period (FY): 2013-08-30 – 2015-03-31
• Keywords: P.gingivalis

Outline of Annual Research Achievements

KgpによるOPGの分解に依存した破骨細胞形成の促進がP. gingivalis感染に伴う炎症性骨破壊に重要な役割を果たすこと、さらに、Kgp耐性OPGが歯周病性骨破壊の予防・治療に有効な新規薬剤となる可能性を検証するため
OPGのKgpによる第一段階の分解以降の分解を明らかにする
Kgpとの反応で、OPGは、約37kDaと約19kDaの断片に分解するが、その後、さらに断片化する様子が観察された(論文投稿)。そこで、上記のN末蛍光標識OPGをKgpと反応させた後、SDS-PAGEで分解断片を分離し、各分解断片の蛍光およびクマシータンパク染色により検出される断片を比較し、各断片がN末側のRANKL結合領域を含む37kDa断片に由来するか、C末側の19kDa断片に由来するかを決定した。その効果を確認するため変異および野生型OPGのN末蛍光標識体を調製し、RANKL結合実験を行う。RANKL結合能を有する変異体および野生型のOPGを骨芽細胞・骨髄細胞共存培養系に添加し、破骨細胞分化抑制能を有する変異OPGをしたがKgp耐性で破骨細胞分化抑制作用の持つOPGの確認はできなかった。
現在複数のLysを同時にArgに置換した変異OPGを調製し、そのKgp耐性およびRANKL阻害活性を評価中である。またP. gingivalis感染モデル動物におけるKgp耐性OPG投与の効果が明瞭でない場合は、OPG欠損マウスを用いて感染モデルを作製し、Kgp耐性OPG投与および野生型OPG投与の効果を比較する予定である。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Porphyromonas gingivalis-derived lysine gingipain enhances osteoclast differentiation induced by tumor necrosis factor-α and interleukin-1β but suppresses that by interleukin-17A: importance of proteolytic degradation of osteoprotegerin by lysine gingipain. (2014)
  • Author(s): Akiyama T, Miyamoto Y, Yoshimura K, Yamada A, Takami M, Suzawa T, Hoshino M, Imamura T, Akiyama C, Yasuhara R, Mishima K, Maruyama T, Kohda C, Tanaka K, Potempa J, Yasuda H, Baba K, Kamijo R
  • Journal Title: The Journal Of Biological Chemistry Volume: 289 Pages: 15621-15630
  • DOI: 10.1074
  • Peer Reviewed / Open Access