2014 Fiscal Year Annual Research Report
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25893298
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
高山 修 岡山大学, 学内共同利用施設等, 助教 (80650879)
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| Project Period (FY) |
2013-08-30 – 2015-03-31
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| Keywords | 産婦人科科学 / 発生工学 / 卵胞培養 / 細胞シート / 不妊治療 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、癌治療のための妊孕性温存や卵巣に眠る多量の生殖資源細胞を生殖補助医療で活用するため、体外でよりよい培養環境を構築するための人工卵巣構築の可能性を探った。
前年度のマウス2次卵胞を用いた検討の結果、細胞シートを積層して培養し、卵胞直径の増大は確認できたが、細胞シートの特性上、長期間の積層状態の維持は困難であることが判明した。そこで、細胞シートを積層する方法の代替法として、マウス線維芽細胞の調整培地の利用を検討した。材料は従来のマウス卵胞に加え、勤務地の異動に伴いヒト卵巣の入手が可能となったため、以降はヒト卵胞を中心に検討を行った。
ヒト卵胞は酵素処理法により単離した。利用した卵胞ステージは、これまでの知見から体外発育(IVG)が困難であり、かつ卵巣内で多量の存在が予想される直径60-100umの初期一次卵胞～二次卵胞を対象とした。酵素処理により、培養中の卵胞の形態維持が困難になったため、アルギン酸ゲルに包埋して培養を行った。マウス線維芽細胞の調整培地は、T-25フラスコに播種後、サブコンフルエントの状態でIVG培地に置換し、1日おきに回収して利用した。アルギン酸ゲル濃度の検討も同時に行った結果、アルギン酸ゲルは2%より0.5%が適しており、調整培地の利用により卵胞直径の有意な増加がみられた。しかし、これらの培養系においても長期培養により卵胞の変性が見られたことから、さらなる発育が継続できるような培養系の改良が今後の課題である。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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