2015 Fiscal Year Annual Research Report
Ｇｉｒｄｉｎファミリー分子の機能と精神神経疾患・がんの病態形成における役割
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26221304
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
高橋 雅英 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (40183446)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
榎本 篤 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (20432255)
浅井 直也 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (80273233)
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| Project Period (FY) |
2014-05-30 – 2019-03-31
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| Keywords | Girdin / Daple / cancer progression / CAF / Wntシグナル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
腫瘍微小環境におけるリン酸化Girdinの意義を検討するため、GirdinのAktによるリン酸化部位であるSer1416をAlanineに置換したノックインマウス（以下SAマウス）を用いて解析した。Lewis lung adenocarcinoma (LLC)を野生型マウスとSAマウスの皮下に移植して、腫瘍増殖を比較した。SAマウスにおいて、腫瘍の増大が有意に抑制されており、腫瘍組織に存在するがん関連線維芽細胞（cancer associated fibroblasts; CAF）の数も有意に少なかった。一方、腫瘍血管量や腫瘍随伴マクロファージの浸潤は両群で有意差が見られなかったことより、血管内皮細胞やマクロファージではなく、CAF内におけるAktによるGirdinのリン酸化が腫瘍の進展に寄与していることが示唆された。SAマウスから得られた線維芽細胞やCAFとがん細胞をマウスへ移植すると、野生型マウスからの線維芽細胞やCAFを用いた群と比較して、腫瘍の増大が抑えられ、CAF内におけるAkt-Girdinシグナルが腫瘍の増殖に寄与していることを支持する結果となった。
胃がんの浸潤、転移におけるDapleの役割を、胃がん組織を免疫染色することにより解析した。その結果、Dapleの発現が高い群ではがん細胞の胃壁への浸潤、リンパ節転移の頻度が高く、予後不良であることが判明した。胃がん細胞株を用いた実験により、DapleをノックダウンするとWnt5aで誘導されるRacおよびJNKの活性とlaminingamma2の発現が低下し、細胞運動能、浸潤能も低下した。胃がん細胞のマウスへの移植系において、Dapleをノックダウンした細胞では肝臓への転移能が有意に低下し、Dapleがnon-canonical Wntシグナルを介した胃がん細胞の浸潤、転移に重要な役割を果たしていることを示した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
腫瘍微小環境におけるリン酸化Girdinの意義を検討するため、GirdinのAktによるリン酸化部位であるSer1416をAlanineに置換したノックインマウスを用いて解析し、腫瘍組織に存在するがん関連線維芽細胞（cancer associated fibroblasts; CAF）におけるAkt-Girdinシグナルの腫瘍の進展における重要性について個体レベルの実験で証明した。
胃がんの浸潤、転移におけるDapleの役割を、胃がん組織を免疫染色することにより解析した。胃がん細胞株を用いた実験と組み合わせて、Dapleがnon-canonical Wntシグナルを介した胃がん細胞の浸潤、転移に重要な役割を果たしていることを示した。
研究計画で提案したGirdinおよびDapleのがんの進展における役割について順調に研究が進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
GirdinおよびDapleのノックアウトマウスあるいはノックインマウスを用いて、生体内の機能の解析を継続する。Girdinのチロシンリン酸化部位に変異を導入したノックインマウスやGEF活性に必須のアミノ酸に変異を導入したノックインマウスを用いて、これらの活性の生体内における意義を解明する。
GirdinおよびDapleの変異とヒト疾患との関連性についても引き続き検討する。
質量分析により同定したGirdinおよびDapleの結合蛋白の機能について、生化学的、細胞生物学的手法を用いて詳細に解析する。
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Research Products
(19 results)
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[Journal Article] Akt-Girdin signaling in cancer-associated fibroblasts contributes to tumor progression2015
Author(s)
Yumiko Yamamura, Naoya Asai, Atsushi Enomoto, Takuya Kato, Shinji Mii, Yuji Kondo, Kaori Ushida, Kaoru Niimi, Nobuyuki Tsunoda, Masato Nagino, Shu Ichihara, Koichi Furukawa, Kengo Maeda, Toyoaki Murohara T, Masahide Takahashi
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Journal Title
Cancer Research
Volume: 75
Pages: 813-823
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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