2017 Fiscal Year Annual Research Report
Study of GABAergic transmission mechanism using glutamate decarboxylase knockout mice
| Project/Area Number |
26290002
|
|---|
| Research Institution | Gunma University |
|---|
Principal Investigator |
柳川 右千夫 群馬大学, 大学院医学系研究科, 教授 (90202366)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
|
| Keywords | GABA / GAD65 / GAD67 / ノックアウトマウス / テトラサイクリン発現システム |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
GABAは神経系の主要な抑制性伝達物質として脳の機能を構築する上で中心的役割を果たしている。GABAは、グルタミン酸脱炭酸酵素（GAD; GAD65とGAD67の2型存在）により合成され、GAD65とGAD67は異なる遺伝子にコードされる。本研究では、GABA神経伝達機構、GABAニューロンの役割、GABA自体の役割、およびGAD65分子とGAD67分子の役割を明らかにすることを目的とした。
GAD67完全型ノックアウトマウスは出生日に全例致死であり、出生日以降の解析ができない。そこで、テトラサイクリン発現システムを利用した時期特異的GAD67ノックアウトマウスの作製を目指した。時期特異的GAD67ノックアウトマウスの作製には、GAD67-tTAノックインマウス（既に作製）とGAD67-tetノックインマウスが必要である。GAD67-tetノックインマウスは、体外受精により得ることができた。2種類のノックインマウスを交配し、ダブルノックインマウスを得た。このダブルノックインマウスにドキシサイクリンを含む餌であるいは含まない餌で飼育した場合の大脳皮質と小脳におけるGAD67発現量についてウエスタンブロット法で比較検討した。ドキシサイクリンを含む餌で4週間飼育した場合、いずれの脳領域でもGAD67発現量が減少した。次に、ドキシサイクリンを含まない餌に戻して4週間飼育するとGAD67発現量が回復した。以上の結果は、ダブルノックインマウスが時期特異的GAD67ノックアウトマウスであることを示唆する。
脳におけるGAD65とGAD67の発現についてラットとマウスでは違いがある。そこで、GAD67完全型ノックアウトラットを作製し、解析した。3週齢で生存するGAD67完全型ノックアウトラットが確認され、出生日に全例致死のGAD67完全型ノックアウトマウスとは重症度が異なることが判明した。
|
| Research Progress Status |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Strategy for Future Research Activity |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
|
Research Products
(10 results)
