2015 Fiscal Year Annual Research Report
カンキツ特有のフラボノイドであるノビレチンの生合成機構の解明
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26292015
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| Research Institution | Shizuoka University |
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Principal Investigator |
加藤 雅也 静岡大学, 農学部, 教授 (10432197)
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2014-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | フラボノイド / ノビレチン / カンキツ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度は、ウンシュウミカン、バレンシアオレンジ、ポンカンのフラベド（果皮部分）におけるフラボノイド含量およびポリメトキシフラボノイド生合成に関わる遺伝子発現の季節変化を調査した。その結果、フラボノイド含量および組成において品種間差が認められ、ポンカンではノビレチン含量が他の２品種と比較して非常に高いレベルであった。さらに、ポンカンでは、ポリメトキシフラボノイド生合成に関わるCit3’OMTおよびCit8OMT遺伝子の発現量が高く、これらのO-メチルトランスフェラーゼ遺伝子がノビレチンの蓄積に関わっていることが示唆された。
平成27年度は、ポリメトキシフラボノイド生合成に関わるO-メチルトランスフェラーゼおよびフラボノイドヒドロキシラーゼ遺伝子の単離を、昨年度から引き続いて行った。O-メチルトランスフェラーゼでは、新たにCit4’OMTを単離した。また、フラボノイドヒドロキシラーゼでは、CitF6H1、CitF6H2、CitF6H3およびCitF3’Hを単離した。単離した遺伝子について、遺伝子発現解析を行ったところ、Cit4’OMT の遺伝子発現は、果実成熟期間中、ポンカンにおいて非常に高いレベルであった。また、CitF6H1およびCitF3’Hの遺伝子発現は、果実成熟後期においてポンカンで高いレベルを示した。
したがって、ポンカンのフラベドにおけるノビレチン生合成には、Cit4’OMT の遺伝子発現が深く関わっていることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成27年度は，平成26年度から引き続き，ポリメトキシフラボノイド生合成に関わるO-メチルトランスフェラーゼおよびフラボノイドヒドロキシラーゼ遺伝子の単離を行った。新たに１つのO-メチルトランスフェラーゼと４つのフラボノイドヒドロキシラーゼを単離した。遺伝子発現解析の結果から，Cit4’OMT の発現が，ノビレチンを高含有するポンカンのフラベドにおいて高く認められた。これらの結果から，Cit4’OMT遺伝子の高い発現量がノビレチンの蓄積に関わっていることが示唆されており，本研究課題はおおむね順調に進展していると考える。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成28年度は，単離したO-メチルトランスフェラーゼのCit4’OMTについて，機能解析を開始する。大腸菌を用いてCit4’OMTのリコンビナントタンパク質を作製する。Cit4’OMTのリコンビナントタンパク質が可溶化されないことも想定し，複数の発現ベクターを用いる。まだ，引き続きノビレチン生合成に関わるO-メチルトランスェラーゼおよびフラボノイドヒドロキシラーゼ遺伝子の単離，発現解析を行う。
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