2016 Fiscal Year Annual Research Report
Roles of neuropeptides in the immune system of teleost fish
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26292115
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
天野 勝文 北里大学, 海洋生命科学部, 教授 (10296428)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 明義 北里大学, 海洋生命科学部, 教授 (10183849)
水澤 寛太 北里大学, 海洋生命科学部, 准教授 (70458743)
筒井 繁行 北里大学, 海洋生命科学部, 講師 (20406911)
阿見彌 典子 北里大学, 海洋生命科学部, 講師 (20588503)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 魚類 / 免疫系 / 脳ホルモン / 腎臓 / 脾臓 / リンパ球 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１．コイの免疫器官における脳ホルモンの分布
魚類における内分泌系と免疫系のクロストークの解明を目的として，コイの免疫器官における神経ペプチドホルモンの存在を分子生物学的手法で調べた．対象とする神経ペプチドホルモンは，プロラクチン放出ペプチド(PrRP)，副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン（CRH），CRH受容体および生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン（GnRH）とした．コイ5尾（体重10～15ｇ）から，免疫器官（血球，脾臓，腎臓）と脳（ポジティブコントロール）を採取し，常法通りRNAを抽出後，cDNAを合成した．GenBankに登録されている塩基配列情報を基にプライマーを設計し，PCRで遺伝子を増幅した．PCR産物をアガロースゲル電気泳動に供して，目的遺伝子の増幅を確認した．増幅が確認された場合には，ダイレクトシーケンスで塩基配列を確認した．PrRP遺伝子発現は全個体の血球で検出されたが，脾臓と腎臓には検出されなかった．一部の個体において，CRH遺伝子発現は血球と腎臓に，CRH受容体遺伝子発現は脾臓と腎臓に，サケ型GnRH遺伝子発現は血球，脾臓，腎臓でそれぞれ検出された．ニワトリⅡ型GnRH遺伝子発現は脳でのみ検出された．これらすべての塩基配列は，既報の配列ときわめて高い同一性を示した．以上の結果，コイの免疫器官に数種の神経ペプチドホルモンが発現していることが明らかとなった．
２．血液塗抹標本における脳ホルモンの免疫組織化学による検出
コイの血球の塗抹標本を作製し，抗PrRP抗体を用いて免疫組織化学染色を行った．その結果，白血球においてPrRP免疫陽性反応が検出されたことから，PCRの結果を支持した．
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(5 results)
