2016 Fiscal Year Annual Research Report
Novel anti-sepsis strategy targeting the endothelial cell-specific receptor Robo4
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26293014
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
岡田 欣晃 大阪大学, 薬学研究科(研究院), 准教授 (50444500)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
土井 健史 大阪大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (00211409)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 血管内皮細胞 / Robo4 / 敗血症 / 炎症 / 低分子化合物 / スクリーニング系 / HDAC阻害剤 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
敗血症は微生物感染等が原因となる全身性炎症反応症候群であり、現在効果的な治療法はなく、その発症メカニズム解明と新規治療法開発が急務となっている。我々は、血管内皮細胞特異的に発現する受容体Robo4を標的とする敗血症治療の可能性について検討を進めている。本年度は、まずRobo4 siRNAが敗血症病態に与える影響を評価した。Robo4発現をin vitroで90%抑制するsiRobo4を敗血症およびコントロールマウスに投与後、各臓器におけるRobo4発現量およびマウス生存時間の解析を行った。その結果、siRobo4はマウス肺のRobo4発現を50%抑制し、敗血症マウスの生存時間を延長させた。またこの時、一部の炎症性サイトカインの血中濃度の抑制がみられた。本結果から、siRobo4が敗血症病態を緩和させることが示唆された。次に、我々がこれまでに見出したRobo4発現抑制活性をもつ低分子化合物ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤Trichostatin A（TSA）が、Robo4発現を抑制するメカニズムを解析した。レポーターアッセイ、ゲルシフトアッセイを用いた解析から、TSAの応答配列がRobo4近位プロモーターに存在すること、またTSAはこの領域に結合する転写活性化因子SP1、GABPの結合に影響を与えないことを見出した。また、Robo4発現抑制に寄与するヒストン脱アセチル化酵素のサブタイプ２種類を同定することに成功した。最後に、TSAとRobo4プロモーターレポーター配列を安定導入した細胞株を用いたRobo4 発現制御化合物のスクリーニング系の構築に成功した。
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Tumor Necrosis Factor α Induces the Expression of the Endothelial Cell-Specific Receptor Roundabout4 through the Nuclear Factor-κB Pathway.2017
Author(s)
Tanaka T, Maekawa N, Kashio T, Izawa K, Ishiba R, Shirakura K, Ishimoto K, Hino N, Aird WC, Doi T, Okada Y.
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Journal Title
Biological and Pharmaceutical Bulletin
Volume: 40(4)
Pages: 504-509
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Adenovirus vector-based incorporation of a photo-cross-linkable amino acid into proteins in human primary cells and cancerous cell lines.2016
Author(s)
Kita A, Hino N, Higashi S, Hirota K, Narumi R, Adachi J, Takafuji K, Ishimoto K, Okada Y, Sakamoto K, Tomonaga T, Takashima S, Mizuguchi H, Doi T.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 6
Pages: 36946
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Efficacy and safety evaluation of claudin-4-targeted antitumor therapy using a human and mouse cross-reactive monoclonal antibody.2016
Author(s)
Hashimoto Y, Kawahigashi Y, Hata T, Li X, Watari A, Tada M, Ishii-Watabe A, Okada Y, Doi T, Fukasawa M, Kuniyasu H, Yagi K, Kondoh M.
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Journal Title
Pharmacol Res Perspect.
Volume: 4(5)
Pages: e00266
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Generation and characterization of a human-mouse chimeric antibody against the extracellular domain of claudin-1 for cancer therapy using a mouse model.2016
Author(s)
Hashimoto Y, Tada M, Iida M, Nagase S, Hata T, Watari A, Okada Y, Doi T, Fukasawa M, Yagi K, Kondoh M.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun.
Volume: 477(1)
Pages: 91-95
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Ubiquitination of Lysine 867 of the Human SETDB1 Protein Upregulates Its Histone H3 Lysine 9 (H3K9) Methyltransferase Activity.2016
Author(s)
Ishimoto K, Kawamata N, Uchihara Y, Okubo M, Fujimoto R, Gotoh E, Kakinouchi K, Mizohata E, Hino N, Okada Y, Mochizuki Y, Tanaka T, Hamakubo T, Sakai J, Kodama T, Inoue T, Tachibana K, Doi T.
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Journal Title
PLoS One
Volume: 11(10)
Pages: e0165766
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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