2015 Fiscal Year Annual Research Report
エンドサイトーシスと外来因子取込を制御する細胞内シグナル伝達マシナリー
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26293041
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
大場 雄介 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30333503)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | シグナル伝達 / エンドサイトーシス / バイオイメージング / インフルエンザウイルス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、平成26年度に質量分析法（44個）と酵母ツーハイブリッド法（6個）で同定した新規PI3K結合因子のうち、2因子について詳細な解析を行った。それぞれについてPI3Kとの結合を生化学的に確認した後、siRNAを用いたノックダウンによって機能解析を行った。その結果、ノックダウンによりRas-PI3K複合体のエンドソームへの移行が阻害され、デキストランやトランスフェリンの取込が抑制された。したがって、これら2因子は当初のねらい通りRas-PI3K複合体の動態制御とエンドサイトーシス制御の両方に関与する分子であると確認できた。
一方で、それぞれの因子が有する固有の機能についても興味深い知見が得られつつある。1つの因子については、エンドソーム以外の他の細胞内小器官に局在することが、免疫蛍光染色により明らかになった。この因子をノックダウンあるいは過剰発現することにより、オルガネラマーカーの細胞内分布に変化が生じた。この結果から、当該因子は異種オルガネラ相互作用や、オルガネラ膜の恒常性維持に関与する因子であると考えら得た。もう一つの因子は、これまである増殖因子下流で機能すると報告されているアダプター分子のファミリーである。しかし、この増殖因子下流においては、我々が同定した因子は直接的な機能を有していない。興味深いことに、他の細胞外刺激に応答して、上記増殖因子受容体の内在化を制御することを示唆するデータが得られつつある。また、当該因子のチロシン残基がSrcファミリーキナーゼによりリン酸化されることも判明した。以上よりこの因子は、Srcファミリーキナーゼを介して、異なる受容体シグナルのクロストーク、特に細胞内移行などの動態制御を介したクロストークに関与する因子であると予想される。
また、他の制御因子についての解析にも着手しており、さらに2因子についてはPI3Kとの結合を確認し、かつ細胞内局在についても解析済みである。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
申請時の調書通りの進捗であるため。
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| Strategy for Future Research Activity |
上記2因子について当初の予定にある解析を進めるとともに、本年度までに見出された固有の機能に関する解析を行い、その結果を本年度中に学術雑誌に投稿する。また、他の因子についても逐次解析をすすめる。
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[Journal Article] Lypd8 promotes the segregation of flagellated microbiota and colonic epithelia.2016
Author(s)
R. Okumura, T. Kurakawa, T. Nakano, H. Kayama, M. Kinoshita, D. Motooka, K. Gotoh, T. Kimura, N. Kamiyama, T. Kusu, Y. Ueda, H. Wu, H. Iijima, S. Barman, H. Osawa, H. Matsuno, J. Nishimura, Y. Ohba, S. Nakamura, T. Iida, M. Yamamoto, E. Umemoto, K. Sano and K. Takeda.
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Journal Title
Nature
Volume: 532
Pages: 117-121
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Receptor activator of NF-κB ligand induces cell adhesion and integrin α2 expression via NF-κB in head and neck cancers.2016
Author(s)
T. Yamada, M. Tsuda, T. Wagatsuma, Y. Fujioka, M. Fujioka, A.O. Satoh, K. Horiuchi, S. Nishide, A. Nanbo, Y. Totsuka, H. Haga, S. Tanaka, M. Shindoh and Y. Ohba.
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Journal Title
Sci. Rep.
Volume: 6
Pages: 23545
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Adaptor protein CRK induces epithelial-mesenchymal transition and metastasis of bladder cancer cells through HGF/c-Met feedback loop.2015
Author(s)
R. Matsumoto, M. Tsuda, L. Wang, N. Maishi, T. Abe, T. Kimura, M. Tanino, H. Nishihara, K. Hida, Y. Ohba, N. Shinohara, K. Nonomura and S. Tanaka.
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Journal Title
Cancer Sci.
Volume: 106
Pages: 709-17
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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