顕微鏡的多発血管炎の克服に向けた基礎・臨床包括的アプローチ

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26293082
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 石津 明洋 北海道大学, 保健科学研究院, 教授 (60321957)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 外丸 詩野 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (20360901)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: MPO-ANCA / MPO-ANCA関連血管炎 / 好中球細胞外トラップ / PAD４ / Cl-amidine

Outline of Annual Research Achievements

【目的】MPO-ANCA関連血管炎では、MPO-ANCAに病原性があることが知られている。そのMPO-ANCAの産生には、好中球細胞外トラップneutrophil extracellular traps (NETs)の過剰が関わっている。NETs形成の経路において中心的な役割を果たしているpeptigylarginine deiminase 4 (PAD4)の作用を阻害することによりMPO-ANCAの産生を抑制できることを示す。
【方法】健常者の好中球にphorbol myristate acetate (PMA)またはPMAと抗甲状腺薬プロピルチオウラシル(PTU)を添加して誘導するNETsに対するPAD4阻害薬Cl-amidineの効果を検討した。次に、BALB/cマウスにPTUを経口投与し、PMAを腹腔内投与することによるMPO-ANCA産生モデルを作成した。このマウスを2群に分けて、一方にはCl-amidineを連日腹腔内投与し、もう一方の群にはPBSを連日腹腔内投与した。2週間後に解剖して、血液ならびに組織学的所見を比較した。
【結果】In vitroで誘導されるNETs形成は、Cl-amidineにより有意に抑制された。In vivoでも、Cl-amidine投与群において腹膜におけるNETsの形成が抑制され、血中MPO-ANCA値がPBS投与群に比べて有意に低値であった。
【結論】PAD4阻害薬はNETsの形成阻害を介してMPO-ANCA産生を抑制する。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成27年度の研究計画はほぼ実施できており、結果も得られている。

Strategy for Future Research Activity

MPO-ANCA関連血管炎の病態指標となる新規マーカーの同定を目指した研究を継続する。

Causes of Carryover

試薬やプラスチック器具等の実験消耗品について、在庫を優先して使用したため、当初の予定よりも支出が抑えられた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

試薬、キット、プラスチック器具等の購入ならびに実験動物飼育費等に、計画的に使用する。また、論文投稿料や雑誌への掲載費、学会発表旅費等の成果発表費にも充てる予定である。

Research Products

• [Int'l Joint Research] Julius-Maximilians-Universitaｔ Wurzburg(Germany)
  • Country Name: Germany
  • Counterpart Institution: Julius-Maximilians-Universitaｔ Wurzburg
• [Journal Article] The responses of macrophages in interaction with neutrophils that undergo NETosis. (2016)
  • Author(s): Nakazawa D, Shida H, Kusunoki Y, Miyoshi A, Nishio S, Tomaru U, Atsumi T, Ishizu A.
  • Journal Title: J Autoimmun Volume: 67 Pages: 19-27
  • DOI: 10.1016/j.jaut.2015.08.018
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Establishment of vascular endothelial cell-reactive type II NKT cell clone from rat model of autoimmune vasculitis. (2015)
  • Author(s): Iinuma C, Waki M, Kawakami A, Yamaguchi M, Tomaru U, Sasaki N, Masuda S, Matsui Y, Iwasaki S, Baba T, Kasahara M, Yoshiki T, Paletta D, Herrmann T, Ishizu A.
  • Journal Title: Int Immunol Volume: 27 Pages: 105-114
  • DOI: 10.1093/intimm/dxu088
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Fatal cardiac small vessel involvement in ANCA-associated vasculitis: an autopsy case report. (2015)
  • Author(s): Iwasaki S, Suzuki A, Fujisawa T, Sato T, Shirai S, Kamigaki M, Otsuka N, Tomaru U, Ishizu A.
  • Journal Title: Cardiovasc Pathol Volume: 24 Pages: 408-410
  • DOI: 10.1016/j.carpath.2015.07.005
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Macrophages transiently reinforce neutrophil extracellular trap (NET)-related immunity and thereafter remove neutrophils that undergo NETosis. (2015)
  • Author(s): Ishizu A, Nakazawa D, Shida H, Kusunoki Y, Miyoshi A, Nishio S, Tomru U, Atsumi T.
  • Organizer: 第44回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 札幌コンベンションセンター（北海道）
  • Year and Date: 2015-11-18 – 2015-11-20
• [Presentation] Identification of autoantigen recognized by rat vascular endothelial cell-reactive vasculitis-inducible type II NKT cell clone. (2015)
  • Author(s): Nishioka Y, Yamaguchi M, Kawakami A, Munehiro M, Tomaru U, Ishizu A.
  • Organizer: 第44回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 札幌コンベンションセンター（北海道）
  • Year and Date: 2015-11-18 – 2015-11-20
• [Presentation] MPO-ANCA関連血管炎におけるNETs-ANCA悪循環 (2015)
  • Author(s): 石津明洋
  • Organizer: 第59回日本リウマチ学会総会・学術集会シンポジウム「ANCA関連血管炎のUpdate」
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（愛知県）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
  • Invited
• [Presentation] 抗ラクトフェリン抗体の病原性 (2015)
  • Author(s): 志田玄貴，中沢大悟，外丸詩野，川上民裕，渥美達也，石津明洋．
  • Organizer: 第59回日本リウマチ学会総会・学術集会ワークショップ「血管炎」
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（愛知県）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] NETs-ANCA vicious cycle in MPO-ANCA-associated vasculitis. (2015)
  • Author(s): Ishizu A, Nakazawa D, Shida H, Kusunoki Y, Miyohi A, Nishio S, Tomaru U, Atsumi T, Yoshid M.
  • Organizer: 17th International Vasculitis and ANCA Workshop
  • Place of Presentation: London (UK)
  • Year and Date: 2015-04-19 – 2015-04-22
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Establishment of vascular endothelial cell-reactive type II NKT cell clone from rat model of autoimmune vasculitis. (2015)
  • Author(s): Ishizu A, Iinuma C, Waki M, Yamaguchi M, Kawakami A, Nishioka Y, Sasaki N, Tomaru U, Yoshiki T, Paletta D, Herrmann T.
  • Organizer: 17th International Vasculitis and ANCA Workshop
  • Place of Presentation: London (UK)
  • Year and Date: 2015-04-19 – 2015-04-22
  • Int'l Joint Research
• [Remarks] 北海道大学学術成果コレクション
  • URL: http://eprints.lib.hokudai.ac.jp/dspace/handle/2115/59840
• [Remarks] 北海道大学学術成果コレクション
  • URL: http://eprints.lib.hokudai.ac.jp/dspace/handle/2115/61171