2014 Fiscal Year Annual Research Report
ウイルス由来非コードRNAのプロセシング制御による新規腫瘍溶解性ウイルスの開発
| Project/Area Number |
26293118
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
櫻井 文教 大阪大学, 薬学研究科(研究院), 准教授 (70370939)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | アデノウイルス / 非コードRNA / プロセシング / 腫瘍溶解性ウイルス / Dicer |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
平成26年度は、Dicerによるアデノウイルス（Ad)由来小分子RNA（VA-RNA)のプロセシングがeIF2alphaのリン酸化に及ぼす影響について検討した。その結果、全長VA-RNAコピー数とeIF2alphaのリン酸化阻害レベルとに相関が見られた。さらにDicerに対するshRNAを搭載した腫瘍溶解性Adを作製し、各種腫瘍細胞におけるAdの増殖および殺細胞効果を検討したところ、従来の腫瘍溶解性Adと比較し、高効率なAd増殖ならびに殺細胞効果が観察された。現在、DicerノックダウンによるAd感染増殖の促進機構について検討を進めている。またDicerノックダウンによるまた、Dicerノックアウト細胞を作製するために、ガイドRNA/Cas9発現カセットの作製に取り組んだ。現在、本カセットを用いてDicerノックアウト細胞を作製中である。またDicerノックダウンが他の腫瘍溶解性ウイルス（レオウイルス）の増殖に及ぼす影響についても検討を行った。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成26年度は主に、Dicerに対するshRNA発現カセットを挿入した腫瘍溶解性アデノウイルスを作製し、その特性解析をおこなった。その研究成果に関しては、現在2報論文投稿中、14件学会発表済みである。さらに当初の研究計画にはなかったものの、本研究実施中に見出した発見をさらに展開することで2報の論文を発表した。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は当初の計画通り、Dicerに対するshRNA発現カセットを搭載した腫瘍溶解性Adの特性解析やDicerノックアウト細胞の作製、DicerノックダウンによるAd増殖促進メカニズムの解明などに取り組む予定である。また研究協力者として引き続き2名の大学院生の参画によって研究を推進していることを計画している。
|
| Causes of Carryover |
発注した試薬に関して、納期が遅れたため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
研究試薬を購入する。
|
