2015 Fiscal Year Annual Research Report
脱分化脂肪細胞の培養上清およびExosomeを用いた再生医療
| Project/Area Number |
26293170
|
|---|
| Research Institution | Nihon University |
|---|
Principal Investigator |
松本 太郎 日本大学, 医学部, 教授 (50366580)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
副島 一孝 日本大学, 医学部, 准教授 (00246589)
加野 浩一郎 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (80271039)
風間 智彦 日本大学, 医学部, 助手 (80525668)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | 再生医学 / 脂肪細胞 / 脱分化脂肪細胞 / エクソソーム / 間葉系幹細胞 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
1. DFAT、骨髄MSC、脂肪組織由来幹細胞(ASC)に由来するexosomeの解析
同一ドナーに由来するDFATおよびASCの培養上清より、exosome濃縮試薬を用いてexosomeを単離した。Total RNAを抽出し、exosome中のマイクロRNAのプロファイルをmiRNAマイクロアレイを用いて解析した(n =4)。その結果、DFAT由来exosomeとASC由来exosomeは再現性よく近似したマイクロRNA発現プロファイルを示すことが明らかとなった。ASC由来exosomeに検出されず、DFAT由来exosomeのみに検出されるマイクロRNAが６つ同定された。一方、ASC由来exosomeにのみ検出されるマイクロRNAは同定されなかった。以上の結果より、DFAT由来exosomeはASC由来exosomeに類似したマイクロRNAプロファイルを示し、さらにDFATに特有のマイクロRNAも存在することが示唆された。
2. DFAT由来exosomeの培養細胞に及ぼす影響
・培養血管内皮細胞に及ぼす影響：PKH67で蛍光標識したDFAT, ASC由来exosomeのヒト臍帯静脈血管内皮細胞(HUVEC)への取り込みを検討した。その結果、これらのexosomeはどちらも血管内皮細胞へ取り込まれることが確認できた。DFATをHUVECと共培養すると、HUVECの増殖、遊走、管腔形成が促進したが、DFAT由来exosome添加では、これらの明らかな促進効果は認められなかった。
・培養単球、マクロファージに及ぼす影響：PKH67で蛍光標識したDFAT, ASC由来exosomeのヒト培養単球・マクロファージへの取り込みを検討した。その結果、DFAT、ASC由来exosomeの培養単球・マクロファージへの取り込みは検出できなかった。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
DFAT、ASC由来exosomeが含有するマイクロRNAのプロファイルを解析し、その差異を明らかした。またDFAT由来exosomeの血管内皮細胞に対する取り込みおよび細胞機能に対する影響を明らかにした。一方LPS刺激により感作させたDFATから分泌されるexosomeのmiRNAプロファイルの変化を検討する予定であったが、実施に至らなかった。またDFAT由来exosomeの椎間板髄核細胞に及ぼす影響を検討する予定であったが実施に至らなかった。以上の理由により研究は予定よりやや遅れて進行していると思われる。
|
| Strategy for Future Research Activity |
最近、MSC由来exosomeがTリンパ球の分化を制御するとの報告があるため、次年度は、ヒトTリンパ球に対するDFAT由来exosomeの取り込み、細胞機能に対する影響を検討していく。また本年度実施できなかったウサギ椎間板髄核細胞に対するDFAT由来exosomeの影響を検討する。これらのin vitro実験結果にもとづき、適切な疾患モデルを用いたexosomeの生物個体における治療効果の検討を行う。
|
| Causes of Carryover |
当該年度に購入予定であったExosome濃縮キットなど数種類の試薬が海外からの取り寄せのため納入が次年度になることが明らかになった。このため、物品費経費に余剰が生じ、これらを次年度に繰り越した。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成２７年度に繰り越した数種類の試薬は、平成２８年度上半期に購入予定である。
|
Research Products
(12 results)
-
-
[Journal Article] Small buccal fat pad cells have high osteogenic differentiation potential.2016
Author(s)
Tsurumachi N, Akita D, Kano K, Matsumoto T, Toriumi T, Kazama T, Oki Y, Tamura Y, Tonogi M, Isokawa K, Shimizu N, Honda M
-
Journal Title
Tissue Engineering Part C
Volume: 22
Pages: 250-259
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Use of rat mature adipocyte-derived dedifferentiated fat cells as a cell source for periodontal tissue regeneration.2016
Author(s)
Akita D, Kano K, Saito-Tamura Y, Mashimo T, Sato-Shionome M, Tsurumachi N, Yamanaka K, Kaneko T, Toriumi T, Arai Y, Tsukimura N, Matsumoto T, Ishigami T, Isokawa K, Honda M
-
Journal Title
Frontier Physiology
Volume: 7
Pages: 50
DOI
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] Systematic implantation of dedifferentiated fat cells ameliorated monoclonal antibody 1-22-3-induced glomerulonephritis by immunosuppression with increasing in TNF-stimulated gene 62015
Author(s)
Maruyama T, Fukuda N, Matsumoto T, Kano K, Endo M, Kazama M, kazama T, Ikeda J, Matsuda H, Ueno T, Abe M, Okada K, Soma M, Matsumoto K, Kawachi H
-
Journal Title
Stem Cell Research and Therapy
Volume: 6
Pages: 80
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
[Presentation] 脱分化脂肪細胞(DFAT)の全身投与はTSG-6を介して免疫性糸球体腎炎を改善した2015
Author(s)
丸山高史, 福田昇, 渡辺めぐみ, 上野高浩, 阿部雅紀, 松本太郎, 遠藤守人, 岡田一義, 松本紘一, 相馬正義, 河内裕
Organizer
第38回日本高血圧学会総会
Place of Presentation
愛媛県県民文化会館（愛媛県・松山市）
Year and Date
2015-10-09
-
-
-
