2014 Fiscal Year Annual Research Report
マイクロRNAによる心筋リプログラミングと分子基盤の解明
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26293193
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
家田 真樹 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (70296557)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 心筋 / リプログラミング |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1. 心筋特異的に発現するマイクロRNAの網羅的解析
心筋リプログラミングを促進するマイクロRNAを見出すため、まずその候補因子として心筋特異的に発現するマイクロRNAを同定した。方法としては自ら開発した心筋細胞と線維芽細胞のFACSによる細胞選別法を用いて（Ieda et al, Dev Cell, 2009）、心筋特異的マイクロRNAの発現をマイクロアレイ法で解析。実験の結果、既知のmiR-1,miR-133に加えて複数の新規心筋特異的マイクロRNAを見出した。
2. 心筋直接リプログラミングを促進するマイクロRNAの同定
新規のものも含めた 複数の心筋特異的マイクロRNAの中から心筋リプログラミングを促進するマイクロRNAを同定する。スクリーニング方法としてはαMHC-GFPマウスの心臓線維芽細胞にGata4/Mef2c/Tbx5の3因子を導入する際に、同時にマイクロRNA機能を増強するマイクロRNA mimic (miR)を導入して心筋誘導効果をαMHC-GFP、cardiac troponin T (cTnT)の心筋マーカーでFACSにより定量的に解析する。これまでの実験でmiRの遺伝子導入効率が90%以上であること、心筋リプログラミングを促進する心筋特異的マイクロRNA (miR-133)を同定することに成功した。今後さらにスクリーニングを続け、さらに心筋誘導を改善するマイクロRNAがないか検討する。またマイクロRNAのみで心筋リプログラミングが可能かも検討する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
心筋リプログラミングを促進する可能性のある新規マイクロＲＮＡを予想外に同定し、さらに過剰発現実験などによるマイクロＲＮＡの性質を調べる追加実験の必要が生じたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
マイクロRNAにより誘導される心筋様細胞の経時的変化やマイクロRNAによる心筋リプログラミングの分子基盤解明を行う。具体的にはBioinformaticsを用いたターゲットの同定、マイクロアレイで遺伝子変化を確認する。さらにmiR-133以外で心筋リプログラミングを改善するマイクロRNAを同定する。
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| Causes of Carryover |
心筋リプログラミングを誘導するmiR-133を同定したが、網羅的解析により複数の心筋特異的マイクロRNAを見出したため今後さらにスクリーニングを続ける必要が生じた。複数の心筋特異的マイクロRNAの中で、他に心筋誘導を改善するマイクロRNAがないか検討する必要が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
複数の心筋特異的マイクロRNAの中で、他に心筋誘導を改善するマイクロRNAがないかをFACS、免疫染色、マイクロアレイなどで検討する。さらにマイクロRNAのみで心筋リプログラミングが可能か分子生物学的に解析する。
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[Journal Article] Effective Cibenzoline Treatment in a Patient With Midventricular Obstruction After Transcatheter Aortic Valve Implantation.2016
Author(s)
Isobe S, Ieda M, Kohno T, Nishiyama T, Maekawa Y, Tsuruta H, Murata M, Yashima F, Yanagisawa R, Tanaka M, Inami S, Nasuno T, Haruyama A, Sano M, Hayashida K, Fukuda
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Journal Title
Circ Heart Fail
Volume: 9
Pages: e002629
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Neural crest-derived resident cardiac cells contribute to the restoration of adrenergic function of transplanted heart in rodent.2016
Author(s)
Tamura Y, Sano M, Nakamura H, Ito K, Sato Y, Shinmura K, Ieda M, Fujita J, Kurosawa H, Ogawa S, Nakano S, Matsuzaki M, Fukuda K.
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Journal Title
Cardiovasc Res.
Volume: 109
Pages: 350-7
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Fibroblast Growth Factors and Vascular Endothelial Growth Factor Promote Cardiac Reprogramming under Defined Conditions.2015
Author(s)
Yamakawa H, Muraoka N, Miyamoto K, Sadahiro T, Isomi M, Haginiwa S, Kojima H, Umei T, Akiyama M, Kuishi Y, Kurokawa J, Furukawa T, Fukuda K, Ieda M.
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Journal Title
Stem Cell Reports.
Volume: 5
Pages: 1128-42
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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