2017 Fiscal Year Annual Research Report
Cardiac reprogramming and miRNA
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26293193
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
家田 真樹 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (70296557)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | リプログラミング / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
マイクロRNAはシードシークエンスと配列が一致する遺伝子の3-UTR領域に直接結合して、遺伝子の発現を抑制して機能する。そこで心筋リプログラミングの分子基盤を解明するため、miR-Xの作用を説明できるターゲット遺伝子を同定した。方法としてはmiR-X導入により発現が低下する遺伝子をマイクロアレイ法で探索して、候補遺伝子をTargetScanなどのBioinformaticsで絞り込んだ。最終的に候補遺伝子の発現抑制をルシフェラーゼアッセイ、遺伝子発現や蛋白発現の低下をqRT-PCRやWestern blotなどで確認する。これまでの実験でmiR-Xの新規ターゲットとなる標的遺伝子Yを同定することに成功した。遺伝子YはEpithelial-Mesenchymal Transition(EMT)のマスター遺伝子として知られており、miR-X によるYの発現抑制により線維芽細胞の表現型が消失することを説明できる。さらに遺伝子Yの過剰発現によりmiR-X による心筋誘導効果が抑制されることも確認しており、miR-XによるYの抑制と線維芽細胞の表現型消失が心筋リプログラミング促進の分子基盤の一つであることが示唆された。さらに上記マウス研究で同定したmiR-Xを自ら同定したヒト心筋リプログラミング因子(GMTMM)と一緒にヒト線維芽細胞に導入して、ヒト心筋誘導効果を解析した。具体的にはこれまでの研究で得た知見や材料を利用して、qRT-PCR、免疫染色、FACS、マイクロアレイや生理機能的検査（Caイメージ、細胞拍動、パッチクランプ）でヒト心筋誘導が確認できた。
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| Research Progress Status |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Direct In Vivo Reprogramming with Sendai Virus Vectors Improves Cardiac Function after Myocardial Infarction2018
Author(s)
1.Miyamoto K, Akiyama M, Tamura F, Isomi M, Yamakawa H, Sadahiro T, Muraoka N, Kojima H, Haginiwa S, Kurotsu S, Tani H, Wang L, Qian L, Inoue M, Ide Y, Kurokawa J, Yamamoto T, Seki T, Aeba R, Yamagishi H, Fukuda K, Ieda M
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Journal Title
Cell Stem Cell.
Volume: 22
Pages: 91～103.e5
DOI
Peer Reviewed
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