2016 Fiscal Year Annual Research Report
The Role of induced lung cancer stem Like cells on invasive activity of lung adenocaricinoma
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26293317
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
眞庭 謙昌 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50362778)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
青井 貴之 神戸大学, 学内共同利用施設等, 教授 (00546997)
林 祥剛 神戸大学, 保健学研究科, 教授 (50189669)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 肺癌 / 発生・分化 / バイオテクノロジー / トランスレーショナルリサーチ / 癌幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
[目的] K-ras 変異陽性の原発性肺腺癌細胞株であるA549 細胞に、特定の因子の導入することにより、癌幹細胞性を有する細胞の誘導を行う。誘導された細胞を用いて、肺腺癌の浸潤部位形成と伸展機序を解明する。
[方法] レトロウイルスベクターを用いて、A549 細胞に体細胞初期化因子(OCT 3/4, SOX2, KLF4)の導入を行い肺癌幹細胞様の細胞(induced Lungcancer stem like cell; iLCSC)を誘導する。そして、元のA549 細胞とiLCSC のSphere 形成能をSphereformation assay により比較する。さらにA549 細胞とiLCSC を、間葉系幹細胞(MSC)、血管内皮細胞(HUVEC)と共に3 次元下で混合培養し、得られたSphere のパラフィン包埋ブロックを作成後、連続切片を作成する。これをHematoxylin eosin(HE)染色や免疫組織化学的手法により、詳細に病理的評価を行う。
[結果] 体細胞初期化因子を導入したA549 細胞において、遺伝子導入後10 日~15 日目に核/細胞質比の高い小型の細胞からなるコロニーを認めた(iLCSC)。iLCSC のSphere 形成能は、もとのA549細胞に比べて著明に高かった。さらにiLCSC を、MSC、HUVEC と共に3 次元下で混合培養することにより、病理学的評価において、肺癌組織構造と類似したオルガノイド(肺癌オルガノイド)を構築した。
[結論] 特定の因子導入によりiLCSC を誘導できると考えられた。またiLCSC を用いることにより、肺癌組織に類似した肺癌オルガノイドを構築することに成功した。
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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