2016 Fiscal Year Annual Research Report
Analyses of oxidative stress-dependent formation of MUTYH/MutSalpha complex
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26340025
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
中津 可道 九州大学, 医学研究院, 准教授 (00207820)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | DNA損傷 / 細胞死 / ミスマッチ修復 / 酸化ストレス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１）細胞死誘導時のMUTYHタンパク質複合体の解析 これまでの解析ではMUTYH と9-1-1複合体との相互作用は確認できなかったので、平成28年度に細胞抽出液の調整法やDNA損傷の条件を検討して解析を行ったが、他の研究者により報告されているような相互作用は確認できなかった。MUTYHは酸化ストレス負荷された細胞内ではDNA polymeraseδと相互作用するが、ある種のDNA polymeraseδ変異体とは相互作用しないことを見出した。この結果はDNA polymeraseδが酸化ストレス負荷による細胞死誘導に重要な働きをしている可能性を示唆する。
２）酸化ストレス誘発時のMUTYHとPCNAとの相互作用の解析 酸化ストレスを負荷された細胞では短時間に一過性のPCNAのモノユビキチン化 (mUb-PCNA) が起こることが報告されている。mUb-PCNAとMUTYHとの相互作用を検討するためにFLAG-MUTYHを発現させた細胞を1mM H2O2処理1時間後に細胞抽出液を調整して解析したところ、H2O2処理によるmUb-PCNAの顕著な生成は認められなかった。面白いことに、本研究で作製したMSH2変異体では未処理でもmUb-PCNAの生成が亢進しており、H2O2処理ではmUb-PCNAの増加しないことを見出した。現在、酸化ストレス誘発細胞死との関連を検討している。
３）酸化ストレス誘発時のMUTYHとMMRとの相互作用の解析 リンチ症候群で見出されるMSH2変異体をCRISPR/Cas9を用いて作製したヒト細胞にF-MUTYHを発現させて50 mM KBrO3および0.2mM H2O2処理後、MUTYHとMutSalphaとの相互作用を検討した。その結果、変異体細胞では、酸化ストレスによるMUTYHとMutSalphaとの相互作用が生じないことが明らかになった。
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[Journal Article] Celecoxib and 2,5-dimethylcelecoxib inhibit intestinal cancer growth by suppressing the Wnt/β-catenin signaling pathway2017
Author(s)
Egashira, I., Takahashi-Yanaga, F., Nishida, R., Arioka, M., Igawa, K., Tomooka, K., Nakatsu, Y., Tsuzuki, T., Nakabeppu, Y., Kitazono, T., Sasaguri, T.
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Journal Title
Cancer Science
Volume: 108
Pages: 108-115
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Insertion and Deletion Mismatches Distant from the Target Position Improve Gene Correction with a Tailed Duplex2016
Author(s)
Kamiya, H., Nishigaki, N., Ikeda, A., Yukawa, S., Morita, Y., Nakatsu, Y., Tsuzuki, T., Harashima, H.
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Journal Title
Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids
Volume: 35
Pages: 378-388
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] BUBR1 insufficiency in mice increases their sensitivity to oxidative stress2016
Author(s)
Matsuda, D., Matsumoto, T., Honma, K., Ikawa-Yoshida, A., Onimaru, M., Furuyama, T., Nakatsu, Y., Tsuzuki, T., Maehara, Y.
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Journal Title
In Vvo
Volume: 30
Pages: 769-776
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] BubR1 insufficiency impairs liver regeneration in aged mice after hepatectomy through intercalated disc abnormality2016
Author(s)
Ikawa-Yoshida, A., Matsumoto, T., Okano, S., Aoyagi, Y., Matsubara, Y., Nakatsu, Y., Tsuzuki, T., Ohkusa, T., Nomura, M., Onimaru, M., Furuyama, T., Maehara, Y.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 6
Pages: 32399
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Development of assay systems to characterize the variants of mismatch repair factor MSH2 found in Lynch syndrome2016
Author(s)
Hayashida, G., Nakatsu, Y., Hidaka, K., Fujikane, R., Hidaka, M., Tsurimoto, T., Tsuzuki, T.
Organizer
The 10th International 3R (Replication, Recombination and Repair) Symposium
Place of Presentation
松江
Year and Date
2016-11-14
Int'l Joint Research
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