2014 Fiscal Year Research-status Report
マウス体系的遺伝解析系を用いたウレタン誘発肺腫瘍感受性の遺伝的解析
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26430088
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
大野 民生 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90293620)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | マウス / 体系的遺伝解析系 / コンソミック系統 / コンジェニック系統 / ウレタン誘発肺腫瘍 / 肺腫瘍感受性遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
マウスSM/J系統とA/J系統を起源として作出されたSMXA・RI系統群やコンソミック系統群等は、複雑な多因子遺伝形質の原因遺伝子解析に極めて有効な体系的遺伝解析系である。A/J系統は肺腫瘍を自然発症するうえ、ウレタン等の化学物質の投与でより早期に肺腫瘍を発症する事から、肺腫瘍のモデルマウスとして汎用されているがその原因遺伝子は未だに明らかになっていない。本研究ではこの体系的遺伝解析系を駆使して、ウレタン誘発肺腫瘍感受性の原因遺伝子の同定を目的とした解析を行った。SMXA・RI系統群の雄個体に生後1ヶ月齢でウレタン(0.45mg/kgBW)を腹腔内投与し5ヶ月後の肺腫瘍数(表現型)と、高精度のSDPパネル(遺伝情報)との連鎖解析をQTL解析ソフトで行ったところ、強力な肺腫瘍感受性遺伝子座は見出せなかった。しかし、比較的効果の小さい遺伝子座が複数検出され、A/J系統の肺腫瘍感受性が複数の遺伝子により支配されていることが判明した。既報の3箇所の遺伝子座(Pas1:Chr.6, Par1:Chr.11, Par2:Chr.18)については本解析においても存在が確認された。一方、SMXA・RI系統群を用いた以前の報告により感受性遺伝子の存在が報告されているChr.12の80Mb付近(Par3)には全く連鎖が認められなかったが、その20Mb程度テロメア側の領域にPar1、Par2と同等またはそれ以上の連鎖が認められた。したがって、Par3領域は従来想定されていた領域とは少し異なりChr.12の100Mb付近に存在する事が明らかとなった。そこで肺腫瘍抵抗性のSM/J系統のPar3領域を感受性のA/J系統に導入したコンジェニック系統(A.SM-Par3)と、同様にSM/J系統のPar1領域をA/J系統に導入したコンジェニック系統(A.SM-Par1)の樹立を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
A/J系統のウレタン誘発肺腫瘍感受性に関与する遺伝子座を複数検出する事ができた。そのうち、Par1領域については従来の報告と同じ位置に存在する事が判明したため順調にコンジェニック系統(A.SM-Par1)が樹立できた。しかし、Par3領域については、従来の位置を想定してコンジェニック系統(A.SM-Par3)の作製に着手していたが、上述のように従来とは位置が少し異なる事が判明したため、再度、コンジェニック系統を作製し直したため、系統樹立が当初の予定より遅延した。
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| Strategy for Future Research Activity |
樹立したコンジェニック系統(A.SM-Par1, A.SM-Par3)と両親系統(A/J, SM/J)系統についてウレタン投与量を変えながら肺腫瘍感受性を解析する。また、Par1、Par3領域内のゲノム変異解析を進め肺腫瘍感受性の原因となる有力な候補遺伝子変異のスクリーニングを行う。更に、両遺伝子座(Par1, Par3)の相互作用を検証するため、ダブル・コンジェニック系統(A.SM-Par1+ Par3)を樹立して、その系統のウレタン誘発肺腫瘍感受性を解析する。
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| Causes of Carryover |
本研究において最重要ターゲットにしているのはPar3領域であるが、肝心のこの領域を導入したコンジェニック系統(A.SM-Par3)の樹立が遅れたため、26年度中に樹立予定であったダブル・コンジェニック系統(A.SM-Par1+ Par3)がまだ樹立できていないため。また、Par3領域については従来とは位置が少し異なる事が判明したため、再度、候補遺伝子の解析をやり直す必要が生じたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
設備備品は必要ないため、ダブル・コンジェニック系統樹立に必要なマウス飼育経費やその遺伝子型判定に使用する試薬類に加え、候補遺伝子の塩基配列や遺伝子発現解析に使用する消耗品類の購入に充てる。
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