2014 Fiscal Year Research-status Report
Notchシグナル活性化による骨代謝制御と骨肉腫発症の分子メカニズムの解明
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26430094
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
八幡 崇 東海大学, 医学部, 准教授 (10398753)
安藤 潔 東海大学, 医学部, 教授 (70176014)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | Notchシグナル / Delta-like 1 / Jagged1 / 骨代謝 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Notchシグナルは、器官形成や幹細胞の運命決定、および、組織の代謝といった生物の恒常性を調節する発生学的に保存されたシグナル伝達経路である。本研究の目的は、Delta-like 1（Dll１）とNotchの結合によるシグナル活性化が、間葉系幹細胞(MSC)から骨芽細胞への分化決定、および、成熟骨芽細胞の形成をどのように制御しているかを分子生物学的に解明することである。
【結果】
＜Dll1Tgマウスの骨形成＞
１．骨芽細胞特異的にDll1を発現するマウス（Dll1Tg）は、骨量が著しく増加する一方で、骨形成・骨吸収がともに低下するという低回転型の骨大理石病様の骨病変を示した。そこで胎生後期（E15.5）から生後１週間の骨髄標本について骨芽細胞分化に係る転写因子の免疫染色を行ったところ、Dll1Tgでは幼弱骨芽細胞マーカー陽性の細胞が骨髄内で顕著に増幅していた。また、成体マウス標本においても同様の現象が確認できた。
２．Dｌｌ１TgおよびDll1KOマウスの骨髄細胞を用いて、骨芽細胞への分化培養を行い、経時的に分化段階を解析すると、Dll1Tgでは未成熟な骨芽細胞の分化は促進しているが、それらの細胞の成熟が抑制されていた。それに対して、Dll1KOでは、MSCまたは骨芽細胞前駆細胞から骨芽細胞への分化が抑制される一方で、骨芽細胞の成熟には変化がみられなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
当初は、モデルマウスの骨病態の特定までが本年度の目標であった。組織標本を用いた一般染色や免疫染色により、Dll1Tgマウスでは未熟な骨芽細胞が増殖し、その一方で成熟が抑制されていることを組織学的に明らかにした。加えて、次年度以降の計画となっていた、骨芽細胞分化培養により、細胞学的にも幼弱骨芽細胞の増殖と、成熟骨芽細胞の分化抑制を確認することが出来た。さらに、Notchシグナルの活性化と骨肉腫の関係を調べるためのモデルである、Dll1Tg－P53KOマウスを作製した。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度以降は、Dll1Tgマウスにおける破骨細胞分化異常の実態を明らかにし、骨芽細胞―破骨細胞の相互作用を解析する。また、Dll1の発現と骨肉腫の関連については、平成２６年度に作製したマウスを維持し観察を続ける。
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| Causes of Carryover |
次年度早々に購入が必要な消耗品が生じたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
血液中のサイトカインを測定するELISAキットの購入を予定している。
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Research Products
(3 results)
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[Journal Article] Establishment of a Humanized APL Model via the Transplantation of PML-RARA-Transduced Human Common Myeloid Progenitors into Immunodeficient Mice2014
Author(s)
Hiromichi Matsushita, Takashi Yahata, Yin Sheng, Yoshihiko Nakamura, Yukari Muguruma, Hideyuki Matsuzawa, Masayuki Tanaka, Hideki Hayashi, Tadayuki Sato, Anar Damdinsuren, Makoto Onizuka, Mamoru Ito, Hayato Miyachi, Pier Paolo Pandolfi, Kiyoshi Ando
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Journal Title
PLOS ONE
Volume: NA
Pages: NA
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] In Vivo Analysis of PML-RARA in a Humanized Mouse Model2014
Author(s)
Hiromichi Matsushita, Takashi Yahata,, Yin Sheng, Yoshihiko Nakamura, Yukari Muguruma, Hideyuki Matsuzawa, Masayuki Tanaka, Hideki Hayashi, Tadayuki Sato, Anar Damdinsuren, Makoto Onizuka, Mamoru Ito, Hayato Miyachi,, Pier Paolo Pandolfi, Kiyoshi Ando
Organizer
America Society of Hematology
Place of Presentation
San Francisco, USA
Year and Date
2014-12-06 – 2014-12-09
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