2014 Fiscal Year Research-status Report
ガンシクロビルにより増殖制御可能な腫瘍融解RNAウイルスの開発
| Project/Area Number |
26430155
|
|---|
| Research Institution | Chiba University |
|---|
Principal Investigator |
白澤 浩 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00216194)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齋藤 謙悟 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (70451755) [Withdrawn]
菅波 晃子 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10527922)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | 腫瘍融解ウイルス / ガンシクロビル / RNAウイルス |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
がん細胞に選択的に感染・ 融解し、治療用外来遺伝子を発現する腫瘍融解ウイルスを臨床応用するためには、効率性と安全性が求められる。がん細胞への吸着性(選択性)を改変できるエンベロープを持ち、外来遺伝子の発現も可能な、染色体への組込みを起こさないRNAウイルスであることが理想的な新世代の武装腫瘍融解ウイルスの条件として挙げられる。この条件に合致するトガウイルス科のシンドビスウイルス(SIN)を、より安全性の高い腫瘍融解ウイルスとするために、ヘルペスウイルスtk遺伝子を組込み、ガンシクロビルにより増殖制御可能な腫瘍融解RNAウイルスを開発することを本研究の目的として、２種類のtk発現シンドビスウイルスを作製する。本年度は、tk遺伝子をウイルス構造蛋白質コード領域のCとp62（E2）との間に挿入し、強力な構造タンパク質発現プロモーターであるサブジェのミックプロモーター（sgPr）によりtkを発現する組換えSINsgtkを作製した。
現在、組換えSINsgtkの増殖能、腫瘍融解性およびガンシクロビルへの感受性の評価をHeLa細胞を用いて確認作業中である。
来年度は、SINsgtkを用いてガンシクロビル耐性株出現の有無の確認・解析、ガンシクロビル高感受性株のクローニングへと研究を進める予定である。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
nsp3にインフレームでtk遺伝子を持つ組換え体SINtkについては、作製が遅れているものの、tk発現レプリコンによる感受性確認としてtk発現プラスミドによる代替実験を行うことにより、サブジェノミックプロモーターによりtkを発現するSINsgtkを予定より早く作製できた。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今回作製した組換えSINsgtkの増殖能、腫瘍融解性およびガンシクロビルへの感受性の評価をHeLa細胞を用いて確認作業を行い、予定通りSINsgtkについてはガンシクロビル耐性株出現の有無の確認・解析、ガンシクロビル高感受性株のクローニングへと研究を進める予定である。
|
| Causes of Carryover |
nsp3にインフレームでtk遺伝子を持つ組換え体SINtkを作製するためのSINrep-sgtkの作製が終了していないため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
nsp3にインフレームでtk遺伝子を持つ組換え体SINtkを作製するためのSINrep-sgtkの作製のために使用する計画である。
|
-
[Journal Article] Reactivation of Hepatitis B Virus in Hematopoietic Stem Cell Transplant Recipients in Japan: Efficacy of Nucleos(t)ide Analogues for Prevention and Treatment.2014
Author(s)
Nakamoto S, Kanda T, Nakaseko C, Sakaida E, Ohwada C, Takeuchi M, Takeda Y, Mimura N, Iseki T, Wu S, Arai M, Imazeki F, Saito K, Shirasawa H, Yokosuka O.
-
Journal Title
Int J Mol Sci.
Volume: 15
Pages: 21455-21467
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
[Journal Article] Suppression of La antigen exerts potential antiviral effects against hepatitis A virus.2014
Author(s)
Jiang X, Kanda T, Wu S, Nakamoto S, Saito K, Shirasawa H, Kiyohara T, Ishii K, Wakita T, Okamoto H, Yokosuka O.
-
Journal Title
PLoS One
Volume: 9
Pages: e101993
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
