2014 Fiscal Year Research-status Report
がん幹細胞の根絶を目指した新規ウイルス療法の基礎開発
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26430156
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
岩井 美和子 東京大学, 医科学研究所, 技術専門職員 (50396884)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ウイルス療法 / がん幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脳腫瘍の中でも膠芽腫は予後不良の難治性腫瘍であり、現状では再発は必至である。その要因の一つとして脳腫瘍幹細胞の存在が考えられている。申請者の所属する研究室ではがん細胞におけるウイルス複製能に優れ、かつ安全性が高い第三世代がん治療用単純ヘルペスウイルスI型のG47Δを開発し、再発膠芽腫を対象とした臨床試験が展開されている。更にG47Δは膠芽腫由来のがん幹細胞にも効率良く感染し破壊することを見出している。そこで、がん幹細胞をも標的とする、脳腫瘍の根絶的な治療に結びつく新規がん治療用HSV-1を開発し、その有効性を評価することを目的として本研究を進めている。
まず、膠芽腫の臨床検体から樹立した複数のがん幹細胞におけるG47Δの効果をin vitroにて検証し、多くの細胞株において高い殺細胞効果を確認できた。更に、がん幹細胞性を失わせる分子として、TGF-βスーパーファミリーに属する骨形成因子（bone morphogenetic protein）の一つであるBMP4分子に着目し、BMP4発現型G47Δ を作製した。作製したウイルスの機能評価として、ゲノム構造の確認、複製能力や抗腫瘍効果の検証ならびに発現タンパクの定量などを行った。BMP4存在下で培養した場合、多くの脳腫瘍幹細胞は分化傾向を示し、またいくつかの細胞株で、BMP4発現型G47Δはin vitroの系でより高い殺細胞効果を示したことから、今後はin vivoの系での検証を進めていく予定である。
また脳腫瘍幹細胞のパネルを用い、BMP発現ウイルスによる治療効果の増強や、幹細胞性に関連する因子のmRNAおよびタンパクレベルでの増減について検討を行い、その関連性を検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
所属研究室では、膠芽腫の臨床検体からがん幹細胞を分離培養することに成功しており、現在も分離培養を続けていることから、複数の脳腫瘍幹細胞に対するG47Δの効果を検討することができた。
また、所属研究室で開発された、任意の遺伝子カセットを確実に挿入可能なG47Δを基本骨格とするbacterial artificial chromosome (BAC) システムを利用することで、短期間でBMP4発現型G47Δ を作製することが可能であった。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成26年度は、in vitroの系を中心に実験を進め、ウイルスの殺細胞効果等を検証できたので、平成27年度は、がん幹細胞で形成したマウス腫瘍モデルを用いたin vivoの系を用いた腫瘍形成能やマウス生存に及ぼす効果を検証し、G47Δの効果と比較検討する。
また、脳腫瘍幹細胞のパネルを用いたBMP4発現ウイルスによる治療効果の増強や、幹細胞性に関連する因子のmRNAおよびタンパクレベルでの増減の比較検討結果から、その関連性を見出す。
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