2015 Fiscal Year Research-status Report
難治性乳がんに対する抗体医薬の開発を目指したEphA10の機能解析
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26430180
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
長野 一也 大阪大学, 薬学研究科(研究院), 准教授 (40548301)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | Eph receptor A10 / 抗体療法 / アカデミア創薬 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、申請者が新規乳がん関連蛋白質として同定した機能未知のEphA10受容体に対する抗体医薬の開発を推進するため、EphA10の機能を明らかにし、抗腫瘍効果メカニズムと起こりうる副作用を解析することで、有効で安全な抗体シーズの創製を目指している。
上記の研究目的を達成するため、本年度は、昨年度に樹立したEphA10のトランスフェクタント（TF）細胞やノックアウト（KO）マウスを利用して機能解析を進めた結果、以下の知見を得た。１）がんの主要な悪性形質である増殖性への影響を解析するため、EphA10の結合因子として知られるEphrinA3, A4, A5をTF細胞と親株に添加したところ、EphA10-TF細胞で有意に増殖活性が亢進した。２）１）をもとに、EphA10の下流のシグナルを解析すべく、両細胞をリガンド刺激した際にTF細胞でのみ発現変動する蛋白質を評価したところ、2倍以上発現が変動した蛋白質を10種類（EphA10を含む）同定した。３）Her2とEphA10の相互作用の可能性を探るべく、昨年度構築したHer2発現プラスミドを両細胞にトランスフェクションさせた。その結果、Her2とEphA10を共発現させた細胞でのみ、それぞれの発現量が増加している傾向が観察された。４）正常組織における機能解析を目的に、EphA10のKOマウスと野生型マウスにおいて、EphA10が発現している精巣の重量を測定した。その結果、野生型マウスに比較してKOマウスにおいて、精巣重量が低下している傾向が観察された。５）臨床応用を見据え、ファージヒト型抗体ライブラリから、ヒト抗EphA10抗体の取得を試みたところ、抗原への結合・選択を繰り返し、目的とする抗体が濃縮された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画した内容にそって、研究が進行しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
TF細胞やKOマウスを活用して、引き続き、EphA10の機能解析を進める。また、得られた知見をもとに、既に取得している抗EphA10抗体の中和活性や体内分布などを解析するとともに、ヒト抗EphA10抗体を新たにスクリーニングすることで、EphA10を標的とした有効で安全な治療法の開発を目指す。
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| Causes of Carryover |
当該年度の研究を効率よく進められ、当初見積もった予算以下で実施できたことに加え、次年度（平成28年度：最終年度）に多くの予算が必要であることが推察されたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度（平成28年度）の当該研究の推進に使用する予定である。
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Research Products
(7 results)
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[Presentation] 乳がん関連たんぱく質EphA10の各種がんでの発現分布の解析2016
Author(s)
長野一也, 森 宣瑛, 永野貴士, 向井美穂, 大須賀絵理, 竹谷苑子, 芳賀優弥, 井阪 亮, 鎌田春彦, 角田慎一, 堤 康央
Organizer
日本薬学会第136年会
Place of Presentation
パシフィコ横浜（横浜・神奈川）
Year and Date
2016-03-26 – 2016-03-29
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[Presentation] Development and evaluation of a monoclonal antibody against Eph receptor A10 for novel molecular targeted therapy of breast cancers2015
Author(s)
Kazuya Nagano, Yuka Maeda, Takuya Yamashita, Masaki Inoue, Yohei Mukai, Haruhiko Kamada, Kazuma Higashisaka, Yasuo Yoshioka, Yasuo Tsutsumi, Shin-ichi Tsunoda
Organizer
Controlled Release Society Annual Meeting 2015
Place of Presentation
Edinburgh International Conference Centre (Edinburgh, Scotland)
Year and Date
2015-07-26 – 2015-07-29
Int'l Joint Research
