クロストリジウム属におけるトキシンーアンチトキシンシステムの生理学的意義の解明

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26450096
• Research Institution: Kagawa University
• Principal Investigator: 鈴木 基生 香川大学, 医学部, 助教 (80457340)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 桑原 知巳 香川大学, 医学部, 教授 (60263810) ; 今大路 治之 (中山治之) 香川大学, 医学部, 助教 (80294669)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 胞子 / 難培養

Outline of Annual Research Achievements

Segmented filamenous bacteria (SFBs)は腸管粘膜に強く付着する胞子形成性の難培養菌である。SFBは腸管免疫系、特にTh17を誘導する役割を果たすことで近年注目されているが、SFBを無菌マウス内で継体することによりTh17への誘導が見られなくなるという現象を発見した。
SFBは全ゲノム配列の決定の際に多くの変異が見つかっており、マウス内で継体することによってTh17を誘導できないSFB菌株が選択されているのではないかと考えた。そこで、SFBのTh17誘導能が菌株によって異なっているのかを明らかにするために単一クローンのSFBを分離することを試みた。
前年までの研究実績として、SFB胞子をマウスの糞便から精製する方法を確立し、精製胞子がマウス内で発芽、生育し、Th17を誘導することを確認した。
現在の研究実績として、胞子精製において胞子と栄養細胞を分離する操作を改変することにより、胞子を複数の画分に分画することに成功した。現在の進捗状況として、異なる画分の胞子を限界希釈して無菌マウスに接種することにより、単一クローンのSFBを分離することを試みている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

SFBは宿主の免疫を刺激することで最近になって注目を集めている菌であり、当初の研究対象としていたウェルシュ菌からこのSFBを中心とした研究に方針を変更した。しかし、SFBは難培養菌でありマウスに接種することによって生育させる必要があるため、さらに単一クローンSFBの分離にも長期間の培養が必要となるため、現在は達成度がやや遅れている。

Strategy for Future Research Activity

SFBは難培養菌ではあるが、既に胞子の精製には成功しており、精製した胞子が無菌マウス内で発芽し、生育することを確認している。そして、単一クローンSFBの分離についても、現在は確認段階にあるので、今後はそれぞれの菌株についてTh17誘導能を解析し、それらの結果を取り纏め、研究の成果を論文として発表する。さらに、SFBが宿主の免疫系に作用する仕組みの解明を目指して研究を進めて行く。また、SFBのマウスへの接種によらない培養法の確立についても取り組んで行く。

Causes of Carryover

SFBのTh17誘導能を解析するために要する器具、試薬を購入する予定であったが、残高が不足しており、次年度に交付される経費と合わせて購入した方が助成金を有効に活用できると判断したため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

次年度に交付される助成金と合わせて、SFBによるTh17誘導能の解析に必要な器具、試薬を購入する。