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2016 Fiscal Year Annual Research Report

Study on the production of rare disaccharides and rare sugars.

Research Project

Project/Area Number 26450097
Research InstitutionKagawa University

Principal Investigator

高田 悟郎  香川大学, 国際希少糖研究教育機構, 准教授 (50322722)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 森本 兼司  香川大学, 国際希少糖研究教育機構, 准教授 (90363184)
上地 敬子  香川大学, 希少糖研究センター, 博士研究員 (70733426) [Withdrawn]
Project Period (FY) 2014-04-01 – 2017-03-31
Keywords希少糖 / D-アロース
Outline of Annual Research Achievements

本課題は、D-アロース、D-アルトロース及びこれらの希少糖を含む二糖を新規微生物の代謝機能と酵素を用いた新たな生産経路で生産する技術の確立のための基盤研究である。
研究は、①D-グルコシド3-デヒドロゲナーゼの遺伝子組み換えおよび結晶化、構造解析、②未利用資源から得られる、トレハロース、マルトース、セロビオースおよびマンノビオースなど、二糖類の高次利用を目指し、希少糖および希少糖含有二糖の生産技術の確立および③D-アロース、D-アルトロースなど、異なる希少糖を含有する希少糖含有二糖の生産技術の確立を目標に研究を実施した。
まず、①の研究について、初めてD-グルコシド3-デヒドロゲナーゼの組換え酵素の大量生産に成功した。本酵素は疎水性が高く、ヘテロ三量体の形態をとるため組換え隊の作製が困難であったが、成功したことにより、本酵素のX線結晶構造解析を行うため、本酵素の結晶化スクリーニングを行った。結晶は得られたが、本酵素は構造解析がなされていないため引き続き研究を進めている段階である。続いて、②③の研究について、①のD-グルコシド3-デヒドロゲナーゼを用いることで、トレハロースからはアロシルアロース、マルトースからはアロシルグルコース、セロビオースからはアロシルグルコース、二糖だけでなくオリゴ糖にも作用し、様々な希少糖含有二糖を生産することに成功した。しかし、本酵素はマンノシド糖に対する作用が少なくD-アルトロースを含む希少糖含有二糖は殆どできないことが分かった。
本研究により、D-グルコシド3-デヒドロゲナーゼの大量生産に成功した。本酵素は、1位の結合をもつ様々な糖に作用を示し、化学的還元を組み合わせることで様々な希少糖含有二糖については生産することができた。希少糖のみを構成要素とする様々な結合様式の希少二糖の生産も可能となってきており、機能性の解明が期待される。

  • Research Products

    (7 results)

All 2017 2016

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 2 results) Presentation (5 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results)

  • [Journal Article] Amylolytic Enzymes Acquired from L-Lactic Acid Producing Enterococcus faecium K-1 and Improvement of Direct Lactic Acid Production from Cassava Starch2017

    • Author(s)
      Kridsada Unban, Apinun Kanpiengjai, Goro Takata, Keiko Uechi, Wen-Chien Lee, and Chartchai Khanongnuch
    • Journal Title

      Applied Biochemistry and Biotechnology

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1007/s12010-017-2436-1

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] X-ray-induced mutation of Bacillus sp. MR10 for manno-oligosaccharides production from copra meal2017

    • Author(s)
      Siriporn Chaikaew, Apinun Kanpiengjai, Jenjira Intatep, Kridsada Unban, Pairote Wongputtisin, Goro Takata, and Chartchai Khanongnuch
    • Journal Title

      Preparative Biochemistry and Biotechnology

      Volume: 47 Pages: 424-433

    • DOI

      10.1080/10826068.2016.1252929

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] Application of galactokinase for oligosaccharide synthesis2016

    • Author(s)
      Yoshiyasu Sugihara, Goro Takata, Akkharapimon Yotsombat, and Chartchai Khanongnuch
    • Organizer
      Core to core program A. Advanced research networks
    • Place of Presentation
      Chonburi, Thailand
    • Year and Date
      2016-11-14 – 2016-11-15
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Amylase from L-lactic acid producing amylolytic Enterococcus faecium K-1 and its influence on direct lactic acid fermentation from starchy substrate2016

    • Author(s)
      Chartchai Khanongnuch, Krisada Unban, Goro Takata, and Keiko Uechi
    • Organizer
      Core to core program A. Advanced research networks
    • Place of Presentation
      Chonburi, Thailand
    • Year and Date
      2016-11-14 – 2016-11-15
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Recombinant expression and characterization of cellobiose 2-epimerase from Enterococcus phoeniculicola2016

    • Author(s)
      Kohei Mino, Keiko Uechi, Goro Takata, Akkharapimon Yotsombat, Yuji Terami
    • Organizer
      Core to core program A. Advanced research networks
    • Place of Presentation
      Chonburi, Thailand
    • Year and Date
      2016-11-14 – 2016-11-15
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Regulation analysis of sugar metabolic pathway by genome editing method2016

    • Author(s)
      Akane Terai, Goro Takata, Akkharapimon Yotsombat,Yuji Terami
    • Organizer
      Core to core program A. Advanced research networks
    • Place of Presentation
      Chonburi, Thailand
    • Year and Date
      2016-11-14 – 2016-11-15
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Functional modification of cellobiose phosphorylase from Clostridium thermocellum2016

    • Author(s)
      Mami Kazama, Goro Takata, Akkharapimon Yotsombat,Yuji Terami
    • Organizer
      Core to core program A. Advanced research networks
    • Place of Presentation
      Chonburi, Thailand
    • Year and Date
      2016-11-14 – 2016-11-15
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2018-01-16  

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