2017 Fiscal Year Annual Research Report
Development of serological assays for determining MERS coronavirus neutralizing antibody responses
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26450418
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
福士 秀悦 国立感染症研究所, ウイルス第一部, 主任研究官 (80373398)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | MERSコロナウイルス / モノクローナル抗体 / 競合ELISA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成26年度からの本研究課題でMERSコロナウイルスの自然宿主同定、血清疫学的研究を進めるためのMERSコロナウイルス特異的抗体検出法の構築に取り組んできた。ウイルスそのものを用いた中和抗体測定法は抗体測定のゴールドスタンダードであるが、MERSコロナウイルスの取り扱いにはバイオセーフティレベル３実験室での作業が必要である。平成28年度までにMERSコロナウイルスのS蛋白質を被ったVSVシュードタイプを作製し、MERSコロナウイルスそのものを用いない安全でハイスループットな中和抗体測定法を構築した。さらにMERSコロナウイルスのS蛋白質に対するモノクローナル抗体を用いた、競合ELISAによるMERSコロナウイルス特異的抗体検出法を考案した。平成29年度は、引き続きモノクローナル抗体を用いた、競合ELISAによるMERSコロナウイルス特異的抗体検出法の構築とその有用性の検証を行った。モノクローナル抗体は重症急性呼吸器症候群(SARS)コロナウイルスおよび、MERSコロナウイルスに近縁なコウモリコロナウイルスHKU4およびHKU5のS蛋白質に反応せず、MERSコロナウイルスに特異的であることを明らかにした。さらに、MERSコロナウイルスを免疫した動物血清を用いて、競合ELISAによるMERSコロナウイルス特異的抗体検出法の検討を行った。本手法は動物種特異的な二次抗体を必要としないため様々な動物種の血清に応用可能であることから、MERSコロナウイルスの自然宿主同定のためのツールとなると考えられた。本手法の特許申請を行った。また、本研究成果を国際学会、国際誌で公表した。
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[Journal Article] Characterization of novel monoclonal antibodies against the MERS-coronavirus spike protein and their application in species-independent antibody detection by competitive ELISA2017
Author(s)
Fukushi S, Fukuma A, Kurosu T, Watanabe S, Shimojima M, Shirato K, Iwata-Yoshikawa N, Nagata N, Ohnishi K, Ato M, Melaku SK, Sentsui H, Saijo M
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Journal Title
J Virol Methods
Volume: 251
Pages: 22-29
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Presentation] VSV pseudotype and monoclonal antibody-based assays for determining MERS coronavirus neutralizing antibody responses2017
Author(s)
Shuetsu Fukushi, Aiko Fukuma, Hideki Tani, Takeshi Kurosu, Satoshi Taniguchi, Kazutaka Egawa, Masayuki Shimojima, Kazuya Shirato, Shutoku Matsuyama, Hanako Sekimukai, Naoko Iwata-Yoshikawa, Noriyo Nagata, Kazuo Ohnishi, Hiroshi Sentsui, and Masayuki Saijo
Organizer
XIVth International Nidovirus Symposium
Int'l Joint Research
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[Presentation] Characterization of novel monoclonal antibodies against MERS-coronavirus (MERS-CoV) spike protein and their application in competitive ELISA for detecting antibodies to MERS-CoV2017
Author(s)
Shuetsu Fukushi, Takeshi Kurosu, Shumpei Watanabe, Masayuki Shimojima, Kazuya Shirato, Shutoku Matsuyama, Naoko Iwata-Yoshikawa, Noriyo Nagata, Kazuo Ohnishi, Manabu Ato, Hiroshi Sentsui, and Masayuki Saijo
Organizer
第65回日本ウイルス学会学術集会
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