2015 Fiscal Year Research-status Report
炎症性腸疾患時のタクロリムスの薬物体内動態と薬効制御におけるマイクロRNAの役割
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26460195
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
池村 健治 三重大学, 医学部附属病院, 助教 (70513935)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
奥田 真弘 三重大学, 医学部附属病院, 教授 (70252426)
岩本 卓也 三重大学, 医学部附属病院, 准教授 (30447867)
荒木 俊光 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (70343217)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | マイクロＲＮＡ / 潰瘍性大腸炎 / P-糖タンパク質 / タクロリムス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年まで潰瘍性大腸炎モデルラットを作成し、免疫抑制薬タクロリムス(TAC)の体内動態変動要因について検討を行ってきた。その結果、潰瘍性大腸炎モデルラットでは、TACの経口吸収が増加することが明らかとなり、その機構の一部に小腸粘膜に発現するP-糖タンパク質(P-gp)の発現量の減少が関与する可能性を示唆した。
本年度では、潰瘍性大腸炎モデルラットにおける小腸のマイクロRNA（miRNA）発現変動と、小腸上皮細胞におけるP-gpの発現調節におけるmiRNAの役割について検討を行った。潰瘍性大腸炎ラットの小腸におけるmiRNA発現変動をmicroarray法で解析した結果、Sham群に比べ、56種類のmiRNA発現量が顕著に減少し、11種類のmiRNA発現量が顕著に増加していた。さらに、これらの67種類の中から標的予想プログラムを用いMDR1 mRNA の3’-非翻訳領域を標的とするmiRNA候補を抽出した。その結果、1種類のmiRNAのみがMDR1 mRNA の3’-非翻訳領域に相補的配列を有していた。現在、このmiRNAがP-gpの発現量・機能に及ぼす影響について検討を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度の研究計画では、培養細胞を用いたmiRNAによるP-gpの発現調節機構に関する検討を予定していた。現在は、潰瘍性大腸炎モデルラットにおける腸管P-gpの発現変動に及ぼすmiRNAの同定に成功し、このmiRNAがP-gpの発現量・機能に及ぼす影響について検討中であることから、本研究は概ね順調に進行している。
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| Strategy for Future Research Activity |
ヒト胎児腎由来のHEK293細胞にluciferase遺伝子の下流にMDR1 mRNA遺伝子の3'-非翻訳領域の配列を導入したluciferase reporter vectorとmiRNA前駆体をダブルトランスフェクションし、同定したmiRNAによる発現調節機構について検討する。さらに、miRNA阻害剤及びmiRNA前駆体を培養ヒト腸上皮細胞Caco-2細胞に導入後、P-gpのタンパク質発現量及びmRNA発現量をWestern Blot法及びRT-PCR法により評価する。
さらに、三重大学医学部附属病院において潰瘍性大腸炎に対してTACによる治療が開始される患者を対象し、大腸及び小腸の切除標本を用い、miRNA発現量及びP-gp発現量の関連性について検討を行う。
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| Causes of Carryover |
平成27年度に、研究成果発表を目的として海外旅費を計上していたが、発表を予定していた国際学会への参加ができなかったため、未使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
このため、研究成果発表は次年度に行うこととし、未使用額はその経費に充てることとしたい。
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