2014 Fiscal Year Research-status Report
バレル神経回路の機能発達におけるニコチン性アセチルコリン受容体の役割
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26460251
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
山崎 美和子 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (10431305)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 体性感覚野 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題では、視床から興奮性細胞への入力を増強し、かつ抑制性介在細胞への入力を抑制することにより興奮・抑制バランスの修飾作用を発揮することが分かっているニコチン性アセチルコリン受容体に着目し、興奮・抑制バランス依存的なバレル神経回路形成制御機構を明らかにすることを目的とする。バレル神経回路におけるニコチン性アセチルコリン受容体の発現について、mRNAレベルでの解析を行った。
①バレル神経回路を構成する興奮性ニューロンおよび抑制性介在ニューロンに発現するニコチン性アセチルコリン受容体サブユニット構成の同定：リボプローブを用いた高感度の多重蛍光in situ ハイブリダイゼーション法により、大脳皮質バレル野、視床VPM核、三叉神経核の各細胞種における発現サブユニットの構成を明らかにした。
②主たる発現サブユニットに対する特異的抗体の作成に着手：現時点ではノックアウトマウスで反応が消失する特異的抗体が存在しないために、ニコチン性アセチルコリン受容体がシナプス前終末あるいはポストシナプス側に存在するのかといった基本的な局在について未だ不明な点が多い。今年度作成した抗体のうち、N末端側を抗原としたものが特異的抗体に近そうであるという予備データを得た。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度の目標はマウスのバレル神経回路において、興奮性・抑制性ニューロンに発現するニコチン性アセチルコリン受容体サブユニットを同定するというものであった。今年度はIn situ hybridizationによるmRNAレベルでの発現解析が終了し、次の段階としてのタンパクレベルの局在解析に使用するための特異的抗体作成も順調に進行している。従って概ね計画通りの進捗状況といえる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度の研究成果を踏まえ、来年度はタンパク質レベルでの解明を目指す。
そのためにも特異的抗体の作成を急ぎ、来年度中には分子解剖学的な基盤を明らかにすることを目標とする。
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