2019 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of the neural network formation in NZF-2/-3 double knock-out mice that exhibit symptoms of arthrogryposis
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26460259
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| Research Institution | Fujita Health University |
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Principal Investigator |
松下 文雄 藤田医科大学, 保健学研究科, 准教授 (50298543)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
亀山 俊樹 藤田医科大学, 総合医科学研究所, 助教 (60298544)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | neural zinc finger / myelin / transcription factor / 神経発生 / 神経回路 / 関節拘縮 / 遺伝子破壊マウス / トランスクリプトーム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１. 組織学的解析
Myelin transcription factor (Myt)/Neural zinc finger (NZF) ファミリー遺伝子は、胎生期の転写産物の定量的・組織学的解析、および神経細胞に分化誘導できるP19細胞株を用いた機能解析（いずれも申請者ら）から、神経の発生に重要な役割を果たすと考えられた。そこで、申請者らはNZF-2とNZF-3 単独の遺伝子破壊（ノックアウト、KO）マウス、およびこれらの二重KOマウスを作製し、解析を進めて来た。このうち、NZF-2単独およびNZF-2/-3二重KOマウスは、出生直後に呼吸不全により致死となる。その原因は、組織学的解析により横隔神経繊維の形成不全と推測された。野生型、NZF-2KO、NZF-3KO、NZF-2/-3二重KOマウスについて、組織学的な比較検討をおこなったところ、NZF-2KOマウスでは横隔膜への神経投射が胎生15.5日頃にはほぼ認められなくなること、NZF-2/-3二重KOマウスでは、さらに四肢の先端部への神経投射不全などを確認した。
２. 遺伝子発現変化解析
NZFファミリー遺伝子産物は、DNA結合性zincフィンガーモチーフを複数もつ転写制御因子である。そのため、KOマウスではNZFファミリーによって転写制御される遺伝子の発現変化が予想される。胎生期のNZF-2とNZF-3の発現は、胎生12日あたりがピークである。そこで、12日胚の頭頸部RNAを用いた遺伝子発現解析を行ったが、野生型とNZF-2KOおよびNZF-2/-3二重KOマウスの間で、遺伝子発現の大きな変化は認められなかった。今後、サンプリングや発現比較の内容にさらなる工夫が必要と考えている。
３． 成果発表
NZF-2KOとNZF-3KO、およびNZF-2/-3二重KOマウスについて、これまでに得られた知見の論文作成を進めている。
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