2015 Fiscal Year Research-status Report
パッチフルオロメトリー法を用いた機械刺激によるパネキシン1の活性化機構の解析
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26460300
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| Research Institution | Kyushu Nutrition Welfare University |
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Principal Investigator |
野村 健 九州栄養福祉大学, リハビリテーション学部, 准教授 (10706790)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ヘミチャネル / パネキシン1 / Panx1 / 機械刺激 / 膜電位 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヘミチャネルであるパネキシン1（Panx1）は、静水圧や低浸透圧などの機械的な刺激で活性化され、細胞外へのATP放出に深く関わっていると考えられている。しかしながら、Panx1の生理的な役割や機械刺激に対するチャネルの活性化機構についての詳細は未解明なままである。本研究の目的は、機械刺激に対してどのようにPanx1チャネルが活性化されるのかを明らかにすることである。平成27年度は、HEK293細胞にPanx1を大量発現させた細胞を用いて機械刺激に対する単一イオンチャネル開閉機構をパッチクランプ法を用いて検討した。その結果、機械刺激に対するPanx1チャネルの単一イオンチャネル電流の記録に成功した。一方、Panx1チャネルは膜貫通領域に電荷を持ったアミノ酸残基が存在しないにも関わらず、電位依存的なチャネル活性を示した。これらの結果は、チャネルの活性化には機械刺激および膜電位変化の両刺激によって制御されている可能性を示唆している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初のH.27年度実施計画通りに研究が進行しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでの得られた結果に基づき計画を進め、機械刺激に対するPanx1チャネルの活性化機構の解明を進める。また、Panx1チャネルは陰イオン選択性があり膜電位の変化によってもチャネルの開閉が制御されていることから、様々な陰イオン（Cl-、NO3-、SCN-、F-、Br-、Gluconate-）を用いて単一イオンチャネルレベルでのキネティクス解析を行う。
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| Causes of Carryover |
当初購入予定であった機器を購入する必要がなくなったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
最終年度の実験では消耗品の購入がこれまでより多くなることが予想されるため、次年度使用額で消耗品の購入を考えている。
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