2016 Fiscal Year Annual Research Report
Role of cytidine deaminase in cell reprograming process
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26460363
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
長岡 仁 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 教授 (20270647)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 克哉 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 助教 (60733508)
木村 正志 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 講師 (40260575)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 再生医学 / DNA脱メチル化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、iPS細胞作成過程をモデル系として用いて、細胞がリプログラミングされるのに重要な反応であるDNA脱メチル化に関与すると考えられているAID等シチジンデアミナーゼや、TETファミリータンパク質の役割を解析しすることを目的とする。
iPSの樹立時のシチジンデアミナーゼの積極的な関与は認められなかったため、長期培養時におけるiPS形質の安定的な維持での役割についてさらに検討した。AID遺伝子の発現を単細胞レベルでモニターできるMEFから作成した17個のiPS細胞株について、iPS誘導後から60日間長期培養し、AID発現を示すRFP陽性細胞の出現や、AIDのmRNAの発現上昇について検討したが、いずれも認められなかった。iPS作成時に長期培養した際にAIDが発現する事が報告されているが、それらと矛盾する結果となった。
次に、AID遺伝子であるAicdaのプロモーター領域のエピジェネティックな変化を調べるため、iPS細胞株、MEF、ナイーブなBリンパ球、胚中心Bリンパ球から調整したDNAを用いてBisulfite処理を行い、Aicdaプロモーター領域のDNAメチル化の程度を解析した。MEFにおいては55％のCpG部位がメチル化されており、それはナイーブなBリンパ球でも同程度の58％であった。AIDが高発現する胚中心Bリンパ球ではメチル化の割合は低下していたが44%程度であった。それに対して、２系統のiPS細胞におけるメチル化率は、3％および17％であり、胚中心Bリンパ球に比べても顕著に低いことが明らかになった。Oct4プロモーター領域では、メチル化率はMEF79％、iPS細胞11％－14％であり矛盾ない。AIDプロモーター領域はiPS化に伴うゲノム脱メチル化に沿って低メチル化状態になるが、AIDの高発現にはつながっていないことが示された。細胞のiPS化時のAID発現の違いは、実験系により転写因子のavailabilityの差に起因している可能性が考えられた。
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[Journal Article] M2-like macrophage polarization in high lactic acid-producing head and neck cancer.2017
Author(s)
Ohashi, T, Aoki, M, Tomita, H, Akazawa, T, Sato, K, Kuze, B, Mizuta, K, Hara, A, Nagaoka, H, Inoue, N, Ito, Y
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Journal Title
Cancer Sci
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Four-and-a-half LIM Domains 1 (FHL1) Protein Interacts with the Rho Guanine Nucleotide Exchange Factor PLEKHG2/FLJ00018 and Regulates Cell Morphogenesis.2016
Author(s)
Sato, K., Kimura, M., Sugiyama, K., Nishikawa, M., Okano, Y., Nagaoka, H., Nagase, T., Kitade, Y., and Ueda, H.
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Journal Title
J Biol Chem
Volume: 291
Pages: 25227-25238
DOI
Peer Reviewed / Open Access
