2015 Fiscal Year Research-status Report
始原生殖細胞のエピジェネティックリプログラミングに関与する新規遺伝子の機能解析
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26460367
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
田代 文 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40136213)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 始原生殖細胞 / エピジェネティック制御 / ヒストン / DNAメチル化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Ces1遺伝子は、Znフィンガータンパク質をコードし、多能性幹細胞と生殖細胞系列に強く発現しているが、その機能は明らかではない。我々の解析では、Ces1は胎生期には全身に発現し、細胞内の核ヘテロクロマチンに局在していた。
本研究においては、始原生殖細胞のエピジェネティック制御におけるCes1遺伝子の機能を明らかにすることを目的としており、平成27年度は下記の研究を行った。
① Ces1 ノックアウトマウスは、部分的な胎生致死、始原生殖細胞の発生異常、およびそれに伴う出生後の生殖腺の形成不全を示した。Ces1ノックアウトマウスの胎児において全身的なH3K9メチル化レベルの亢進が見られることを確認し、Ces1が胎生期のエピジェネティック制御、特にH3K9メチル化の抑制に関与する可能性が示唆された。
② 胎児のクロマチンを用いたChIP-qPCR解析の結果、ペリセントロメア領域のH3K9トリメチル化レベルがCes1ノックアウトにおいて増加していることが示され、Ces1がヒストンH3K9メチル化に影響し、胎児成長や生殖細胞の分化制御に関与することが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成27年度に予定していた研究を施行し、Ces1がヒストンH3K9メチル化に関与する可能性を示した。
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| Strategy for Future Research Activity |
ヒストンたんぱく質の修飾を制御する因子の中には、DNAのメチル化にも影響するものが報告されている。そこで、DNAのメチル化状態によって発現が制御される遺伝子について、Ces1ノックアウトによりDNAのメチル化に異常をきたし、転写活性が変化しているものがないか検討する。方法としては、FACSにより始原生殖細胞を分離、DNA抽出を行い、バイサルファイトシーケンスによりCpGアイランドのメチル化の状態を検討する。
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