2014 Fiscal Year Research-status Report
メルケル細胞癌のMCPyV陽性群と陰性群の発癌機序比較に基づく治療法探索
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26460433
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
林 一彦 鳥取大学, 医学部, 教授 (30180962)
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2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | メルケル細胞癌 / ポリオーマウイルス / 免疫グロブリン / 新規ウイルス検出法 / シグナル伝達系 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
MCPyV陽性症例群のメルケル細胞癌腫瘍細胞のみに免疫グロブリン（IgG, IgA, IgM）が発現し、MCPyV陰性群では陰性であり、さらに特に軽鎖はIgκ鎖のみが発現してIgλが発現しない事実を確認して、学会発表して論文に掲載した(Am J Surg Pathol. 2014;38(12):1627-35)。この現象はメルケル細胞癌がリンパ球に由来することを意味せず、MCPyVに感染したメルケル細胞癌により免疫グロブリンが異所性に発現すると考察した。その病態機序は未解明である。
メルケル細胞癌のMCPyV陽性群（30例）とMCPyV陰性群（30例）よりRNAを抽出して
PI3K-Akt系のmTOR, Akt, TSC1, TSC2, 4E-BP1等遺伝子のmRNA発現をRT-PCRで定量して比較検討し、それぞれのシグナル遺伝子の蛋白やそのりん酸化して活性化した産物に対する抗体でFFPE標本の免疫染色が可能なもの（例えば、Akt1(pan)Rabbit mAbとPhospho-Akt(Ser473)Rabbit mAb）をCell Signaling社から購入して免疫染色により両群でのシグナル活性化を比較した。その結果、ほとんどt Akt/mTOR/4E-BP1 pathway signalは、MCPyV陽性症例群と陰性群で亢進して有意差が認めなかったが、 p-Akt(T308)が陰性群で有意に活性化していた。これらの成果は分子標的治療にために有用である(Hum Pathol. 2015;46:210-6)。
メルケル細胞癌のMCPyV陽性群（20例）とMCPyV陰性群（20例）を用いてMCPyV-STの合成ペプチドに対する抗体とMCPyV-ST mRNAに対するProbe:ST 全長(nt 196–756)を作成してそれらの感度と特異度を既存の抗体(CM2B4)と比較検討してこれらが優れていることを報告した(Diagn Pathol. 2014 Mar 20;9:65)
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
この研究が採択される前に、研究のデータをかなり蓄積できていたので、それらを論文として公表できた。
ただし、IgがMCPyV陽性群のみに発現し,IgH再構成があるがMCPyV陰性腫瘍では発現しないことを確認して論文にしたが、Igκ鎖のみが発現する病態機序は未解明である。
あたらしい技術である次世代シークエンサーによる研究がまだ一部しか進展していない。
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| Strategy for Future Research Activity |
MCPyV陽性と陰性のメルケル細胞癌からtotal DNAを抽出し、HiSeqを用いた次世代シークエンサーによる代表的な癌関連遺伝子を網羅的にシークエンスを行って、両群の変異の特徴や異同を明らかにして両群に共通の治療標的を選別するとともに、MCPyV感染に特有の発癌機構に関与する遺伝子を見つける。
これらのデータと遺伝子の変異を誘導する酵素であるAID(activation-induced deaminase)の発現とその制御機構を、MCPyV陽性メルケル細胞癌群と陰性群で比較検討する。
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| Causes of Carryover |
次世代シークエンサーの利用料が高額であるのに、大学の利用料金額が年度末まで決まらず、解析を依頼する症例数が年度末になってやっと決まったため予定金額を執行できなかった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
残額は次年度で依頼する次世代シークエンサーの利用代金の一部として補填する予定である。
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[Journal Article] Immunoglobulin expressions are only associated with MCPyV-positive Merkel cell carcinomas but not with MCPyV-negative ones: comparison of prognosis.2014
Author(s)
Murakami I, Takata K, Matsushita M, Nonaka D, Iwasaki T, Kuwamoto S, Kato M, Mohri T, Nagata K, Kitamura Y, Yoshino T, Hayashi K.
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Journal Title
Am J Surg Pathol.
Volume: 38(12):
Pages: 1627-35.
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] High viral load of Merkel cell polyomavirus DNA sequences in Langerhans cell sarcoma tissues.2014
Author(s)
Murakami I, Matsushita M, Iwasaki T, Kuwamoto S, Kato M, Horie Y, Hayashi K, Gogusev J, Jaubert F, Nakamoto S, Yamakawa M, Nakamine H, Takata K, Oka T, Yoshino T.
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Journal Title
Infect Agent Cancer
Volume: 6;
Pages: 9:15.
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Merkel cell polyomavirus DNA sequences in peripheral blood and tissues from patients with Langerhans cell histiocytosis.2014
Author(s)
Murakami I, Matsushita M, Iwasaki T, Kuwamoto S, Kato M, Horie Y, Hayashi K, Imamura T, Morimoto A, Imashuku S, Gogusev J, Jaubert F, Takata K, Oka T, Yoshino T.
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Journal Title
Hum Pathol.
Volume: 45
Pages: 119-26.
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] メルケル細胞癌のポリオーマウイルス(MCPyV)陽性群と陰性群におけるB細胞関連因子と免疫グロブリン発現の比較検討2014
Author(s)
Kazuhiko Hayashi, Daisuke Nonaka, Michiko Matsushita, Katsuyoshi Takata, Takeshi Iwasaki, Satoshi Kuwamoto, Masako Kato, Keiko Nagata, Yukisato Kitamura, Tadashi Yoshino, Ichiro Murakami
Organizer
日本ウイルス学会
Place of Presentation
横浜市、パシフィコ横浜
Year and Date
2014-11-10 – 2014-11-12
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[Presentation] Comparative analysis of B cell-related marker and immunoglobulin expressions between MCPyV-positive and MCPyV-negative Merkel cell carcinomas2014
Author(s)
Kazuhiko Hayashi, Daisuke Nonaka, Michiko Matsushita, Katsuyoshi Takata, Takeshi Iwasaki, Satoshi Kuwamoto, Masako Kato, Keiko Nagata, Yukisato Kitamura, Tadashi Yoshino, Ichiro Murakami
Organizer
26th European Congress of Pathology
Place of Presentation
ExCel, London, UK
Year and Date
2014-08-30 – 2014-09-03
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[Presentation] Expressions of p63 or/and its isoform, p40, are not correlated with the prognosis of Japanese and British patients with Merkel cell carcinoma2014
Author(s)
Michiko Matsushita, Satoshi Kuwamoto, Daisuke Nonaka, Takeshi Iwasaki, Keiko Nagata, Ichiro Murakami, Masako Kato, Yukisato Kitamura, Kazuhiko Hayashi
Organizer
26th European Congress of Pathology
Place of Presentation
ExCel, London, UK
Year and Date
2014-08-30 – 2014-09-03
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[Presentation] TRAbs production induced by Epstein-Barr virus reactivation in cultured-PBMCs from Graves’ disease patients and healthy controls2014
Author(s)
Keiko Nagata, Yuji Nakayama, Katsumi Higaki, Hiromi Miyauchi, Michiko Matsushita, Satoshi Kuwamoto, Masako Kato, Ichiro Murakami, Takeshi Iwasaki, Hiroshi Kimura, Kazuhiko Hayashi
Organizer
26th European Congress of Pathology
Place of Presentation
ExCel, London, UK
Year and Date
2014-08-30 – 2014-09-03
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