2014 Fiscal Year Research-status Report

ホジキンリンパ腫におけるＣＤ３０によるＨＳＰ９０誘導を介したシグナル伝達制御

Research Project

Project/Area Number	26460440
Research Institution	Kitasato University
Principal Investigator	堀江良一北里大学, 医学部, 准教授 (80229228)
Project Period (FY)	2014-04-01 – 2017-03-31
Keywords	Hodgkinリンパ腫 / CD30 / HSP90
Outline of Annual Research Achievements	本研究はCD30シグナルによるHSP90を介した「Hodgkin リンパ腫（HL）における重要なシグナル伝達経路：NF-κB, ERK, AKT, JAK-STAT等とのクロストークを明らかにする」ことにより、HLにおけるシグナル伝達の脱制御を「従来のような単一経路の積み上げによる説明ではなく、クロストーク機構により俯瞰的に明らかにする」ことを目標とする新たな試みである。我々はFL細胞にCD30を過剰発現させるとHSP90の発現誘導とNF-κB, ERK, AKT, JAK-STATの活性化を誘導することを発見した。このことはCD30がHSP90の誘導を介して様々なシグナル伝達経路のクロストークと活性化維持に寄与することを示唆する。さらにHL細胞株においてCD30をノックダウン、マイクロアレイによる下流のシグナル伝達分子の挙動を網羅的な解析にて行ったところ、多くの遺伝子に変動を認め、HLにおいてCD30過剰発現によるの恒常的な活性化が、下流の遺伝子群に強い影響を与えている事が示唆された。これらの遺伝子群にはHSP90に加えてHLにおける重要なシグナル伝達経路：NF-κB, ERK, AKT, JAK-STATに関わる遺伝子が含まれた。ウエスタン法や免疫染色によっても上記結果を示唆する結果が得られた。さらにHSP90の阻害剤により、これらのシグナル伝達経路が抑制される事が示された。以上のことはCD30がHSP90の誘導を介して様々なシグナル伝達経路のクロストークを維持し、HL特有の分子基盤を維持している可能性を示唆した。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 初年度に計画していた実験はほぼ完了し、仮説の検証に必要な基本的なデータを取得できたから。
Strategy for Future Research Activity	HSP90のプロモーター領域の単離を行う。HSP90プロモーター活性誘導に重要な領域を特定したらその領域に結合しうる転写因子を解析、同定する。HSP90のプロモーターのdeletion mutantはあらかじめ解析しておいた既存の転写因子のマップを参考として作成しておき、可能性の高い既知の転写因子の同定を第一目標とする。さらに同定した転写因子をもとに上流シグナルを含めた制御機構を明らかにしていきたい。同定した転写因子と関連分子をもとにHSP90プロモーター活性誘導を上流からのシグナルからの制御機構と言う形で具体的に明らかにする。現時点ではheat shock factor 1(HSF1)の関与を疑っており、HSF1-HSRE(heat shock responsive element)という視点での解析を行う。
Causes of Carryover	研究は順調に進捗しているものの、論文投稿が予定より遅れ関連費用を繰り越しているため。また一部の実験を繰り越したため。
Expenditure Plan for Carryover Budget	論文投稿関連費用への使用と実験のための物品費として使用する。