2016 Fiscal Year Research-status Report
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26460494
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| Research Institution | Yokohama College of Pharmacy |
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Principal Investigator |
中野 泰子 横浜薬科大学, 薬学部, 教授 (20155790)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
根来 孝治 帝京平成大学, 薬学部, 教授 (70218270)
谷岡 利裕 昭和大学, 薬学部, 講師 (80360585) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | アディポネクチン / マクロファージ / 高分子量アディポネクチン / 易炎症性 / 低アディポネクチン血症 / アディポネクチントランスジェニックマウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
当教室が所有する易炎症性のアディポネクチンアンチセンストランスジェニックマウス (adiponectin anti-sense transgenic mouse、AsTg) の常在性腹腔マクロファージではIL-6、TNF-αの発現が亢進し、抑制性サイトカインであるIL-10が低値を示していた。しかし、このマクロファージを通常のFCS入りの培地で一晩培養するとこの表現型は消失し、wtマウスと同様の表現型に回復する。このことは、アディポネクチン濃度が少し低いだけのin vivo環境下で炎症応答に傾いた表現型を獲得していることを示している。
そこで、平成27年度から、AsTgと野生型マウス（wt）を用いたin vivoでの表現型の解析を計画し、8週令と15週令の血漿、脂肪、肝臓、骨格筋のアミノ酸解析、血漿のサイトカイン解析、肝臓と脂肪、骨格筋で発現している遺伝子のGeneChipによる解析、血算や尿検査、血清の生化学検査、ブドウ糖負荷試験、骨密度・体脂肪測定、脾臓細胞のFACS解析、26週での剖検を実施している。
驚いたことに、オスの15w骨格筋の遺伝子発現に大きな違いが認められることが判明した。マウス骨格筋ではアディポネクチンが高発現しているが、AsTgではこれがほぼ抑制されており、その結果、AsTgオスの骨格筋ではWtに比べ非常に多くの遺伝子の発現が低下していた。もともとアディポネクチンが多く発現しているため発現抑制がそれほど強くない脂肪や発現が極わずかな肝臓ではこれほどの違いは認められないが、やはりオスの脂肪で多くの遺伝子に発現の違いが認められている。これ以外の解析でもサイトカインや免疫細胞に少しずつ様々な違いが認められており、原因やそれらが持つ生理的意味について今後解明していきたい。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
平成28年度より所属大学が変わり、研究環境の整備に時間を要したためかなりの期間実験ができていない。また、同じ研究室で共同研究していた職員も全員別の教室や大学に移動し、それぞれが研究ができるようになるまでに時間を要したため、共同研究者の大学での実験もできなかった。
1年がたち、それぞれが実験できる環境になったので、今後急いで解析を進めたいと思っている。
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| Strategy for Future Research Activity |
in vivoでの状態を確認するための上記検討で採材が終了しているが調整や解析を実施していない試料を優先的に処理、解析し、詳細な表現型の比較検討を進める予定である。
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| Causes of Carryover |
平成28年3月末に昭和大学を退職し、4月より横浜薬科大学に移動したため、研究室の実験環境の整備に時間がかかり、実験がしばらくできなかったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成29年度は、使用できなくなったCO2インキュベーターを新調する。
また、AsTgとwtの組織の免疫染色による解析や定量PCRによる遺伝子発現量の解析、アディポネクチンをはじめとした血中サイトカインの測定など、未実施の解析を優先して行う。
15週令での遺伝子発現に大きな違いが認められた骨格筋について、金銭的余裕があれば8週令でもGeneChipでの解析を行いたい。更に、細胞株C2C12を筋細胞に分化させる系や3T3-L1細胞を脂肪細胞に分化させる系など細胞を使用したアディポネクチン濃度の違いやAsTgとwtで差のでた遺伝子の生理機能に関する検討なども実施する予定である。
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