2014 Fiscal Year Research-status Report
パラミクソウイルスの膜融合における機能的および物理的HN-F相互作用の解析
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26460552
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Research Institution | Mie University |
Principal Investigator |
鶴留 雅人 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50159042)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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Keywords | パラインフルエンザウイルス / HN蛋白 / F蛋白 / 分子間相互作用 / 細胞融合 / 膜融合 |
Outline of Annual Research Achievements |
1. PIV5のHN(PIV5 HN)とSV41のHN(SV41 HN)の頭部領域を互いに交換したキメラHN(CH5-41およびCH41-5)を作製した。CH5-41のStalk領域はPIV5 HNに、頭部領域はSV41 HNに由来するが、PIV5のF(PIV5 F)と特異的に相互作用して(発現開始後12時間で)細胞融合を誘導することを見出した。一方CH41-5の場合、誘導された細胞融合は小規模でF特異性も不明瞭であった。 2. 既報のように、PIV5 Fの頭部領域の21個のアミノ酸をSV41 Fの対応アミノ酸で置換したキメラF(No.36)はSV41 HNと特異的に相互作用して細胞融合を誘導するが、発現開始後24時間まで観察したところ、No.36がPIV5 HNとの共発現でも明瞭な細胞融合を誘導することが新たに判明した。そこでさらに追究した結果、No. 36のStalk領域の3つのアミノ酸をSV41 Fの対応アミノ酸で置換するとPIV5 HNとの相互作用能は著明に低下すること、しかしSV41 HNとの相互作用能は維持されることを明らかにした。 3. 頭部領域を欠いたPIV5 HNにFLAGタグを付加した短縮型HN(PIV5 HN HL-FLAG)PIV5 Fとの同時発現で細胞融合を誘導し、SV41 FやNo.36との相互作用は認められなかった。しかしFLAGタグを除くと、No.36とも相互作用するようになった。一方、SV41HN HL-FLAGはそのstalk領域にGCN4配列を付加することによってようやく機能を発揮し、SV41 Fとの特異的な相互作用能を示したが、PIV5 FやNo. 36との相互作用は認められなかった。また, HPIV2 HN HL-FLAGはGCN4配列を付加してもHPIV2 Fとの相互作用は認められず、予想に反してNo. 36との相互作用が認められた。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
SV41とPIV5の短縮型HN蛋白に加え、HPIV2の短縮型HN蛋白についてもキメラF蛋白との機能的相互作用についても解析することができたため。
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Strategy for Future Research Activity |
平成26年度の結果から, F蛋白との機能的相互作用を規定しているとされているHN蛋白のStalk領域の機能に対して, その頭部領域が重要な関与をしていることが示唆されたため、この問題の追究を平成27年度の計画に加える予定である。
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[Journal Article] Inhibition of human parainfluenza virus type 2 growth in vitro by catechin is caused by the inhibition of genome and mRNA synthesis and by the disruption of cytoskeleton, and that by tannic acid is mainly caused by genome synthesis inhibition and the disruption of cytoskeleton2014
Author(s)
Uematsu J, Kihira S, Uchida M, Sakakura Y, Deguchi S, Sakai K, Yamamoto H, Kawano M, Tsurudome M, O'Brien M, Komada H
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Journal Title
International Journal of Sciences
Volume: 3
Pages: 47-55
Peer Reviewed
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[Journal Article] Ribavirin inhibits human parainfluenza virus type 2 replication in vitro2014
Author(s)
Kihira S, Uematsu J, Kawano M, Itoh A, Ookohchi A, Satoh S, Maeda Y, Sakai K, Yamamoto H, Tsurudome M, O'Brien M, Komada H.
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Journal Title
Microbiology and Immunology
Volume: 58
Pages: 628-635
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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