2016 Fiscal Year Annual Research Report
Involvement of acidification of glomerular cells by AGE-cholesterol-aggregated proteins in development of diabetic nephropathy
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26460635
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| Research Institution | Meijo University |
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Principal Investigator |
永松 正 名城大学, 薬学部, 教授 (70103265)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
水野 智博 名城大学, 薬学部, 助教 (40711669)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | アポトーシス / 糖尿病性腎症 / メサンギウム細胞 / スタウロスポリン / アクチンフィラメント |
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| Outline of Annual Research Achievements |
①メサンギウム細胞(MCs)をpH5.5酸性緩衝液に60分間暴露した。MCsを固定してActin Green488 Regent で染色してBZX770で観察した。pH5.5暴露MCsは、15分後でアクチンフィラメントの脱重合が生じ60分後はフォーカルアドヒージョンを突起の先端とした星状の形態となった。②MCsをミトコンドリアのATP合成酵素を阻害するオリゴマイシンで前処置した。その後、AGE-コレステロール凝集アルブミン(ACAA)を取り込ませ、蛍光染色して観察した。MCsの細胞内pH（pHi）はACAAにより低下した。オリゴマイシンの前処理により、ACAAによるpHi低下は増強された。このことはACAAによるpHiの低下にミトコンドリアが関係していることを示唆している。しかし、アクチンフィラメントの脱重合や細胞質の縮小程度は、ACAA単独処置後24時間MCsの方がオリゴマイシン前処置後にACAAを取り込ませたMCsよりも強かった。このことはACAAによるMCsの形態変化はpHのみに依存しないことを示唆している。③MCsをアポトーシス誘発剤であるスタウロスポリンで処置すると、アクチンフィラメントの脱重合や形態の変化が生じた。そして、スタウロスポリン処置MCsのpHiは対照MCsと比較してより低下(酸性化)した。④MCsにACAAを取り込ませると、処置後12時間目からカスパーゼ3/7陽性細胞の割合が徐々に増加し、42時間目、以後はスタウロスポリンと同程度になった。また、TUNEL陽性細胞の割合は18時間、36時間後でスタウロスポリンの約半分にまで上昇した。しかし、MCs数は、スタウロスポリンでは処置後36時間までほぼ同じであったが、ACAA処置MCs数は、著明に減少した。このことは、MCsがACAAで壊死することを示唆している。
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Research Products
(12 results)
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[Journal Article] Complement component 5 promotes lethal thrombosis2017
Author(s)
Tomohiro Mizuno, Kengo Yoshioka, Masashi Mizuno, Mie Shimizu, Fumihiko Nagano, Tomoyuki Okuda, Naotake Tsuboi, Shoichi Maruyama, Tadashi Nagamatsu, Masaki Imai
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Journal Title
Complement component 5 promotes lethal thrombosis.
Volume: 16
Pages: 42714
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] The Level of IgA Antibodies to Endothelial Cells Correlates with Histological Evidence of Disease Activity in Patients with Lupus Nephritis.2016
Author(s)
Ayako Kondo, Kazuo Takahashi, Tomohiro Mizuno, Akihiro Kato, Daisuke Hirano, Naoki Yamamoto, Hiroki Hayashi, Shigehisa Koide, Hiroshi Takahashi, Midori Hasegawa, Yoshiyuki Hiki, Shunji Yoshida, Keiji Miura, Yukio Yuzawa
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Journal Title
PLoS One
Volume: 27
Pages: e0163085
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Complement promote releasing transglutaminase 2 from cytoplasm.2016
Author(s)
Kaori Hara, Tomohiro Mizuno, Kazuo Takahashi, Masashi Mizuno, Akihiro Kato, Takanori Onouchi, Yutaka Tsutsumi, Hideki Tatsukawa, Tadashi Nagamatsu, Kiyotaka Hitomi, Yukio Yuzawa
Organizer
XXVI International Complement Workshop
Place of Presentation
金沢
Year and Date
2016-09-05
Invited
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