抗CCP抗体陰性関節リウマチの特異抗体の検索 ～抗カルバミル化蛋白抗体を中心に～

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26460649
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 大村 浩一郎 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (40432372)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: カルバミル化 / 抗CarP抗体 / 対応抗原 / アルブミン / 関節リウマチ / 自己抗体

Outline of Annual Research Achievements

平成27年度は抗カルバミル化蛋白抗体（抗CarP抗体）の対応抗原候補を選んで、解析を行った。抗CarP抗体のWestern Blottingのバンドがアルブミン分子サイズと似ていることから、アルブミンをカルバミル化してWestern Blotを行うと抗CarP抗体陽性関節リウマチ（RA）患者血清で特異的なバンドがみられた。抗CarP抗体のELISAアッセイ系で吸収実験を行うと、カルバミル化ヒトアルブミン（Car-huALB）では吸光度が低下するが、ヒトアルブミンやシトルリン化ヒトアルブミンでは吸光度が低下しないことから、アルブミンが抗CarP抗体のひとつの対応抗原であることが示された。これは抗シトルリン化蛋白抗体の対応抗原ではない抗CarP抗体の対応抗原としては世界で初めての蛋白である。Car-huALBを用いて抗Car-huALB抗体のELISA系をつくり、RAでの陽性率を検討したところ、抗CCP抗体陽性RAでは27%が陽性となるものの、抗CCP抗体陰性RAでは1%のみであった。抗Car-huALB抗体と抗CarP抗体価は相関するが、抗CCP抗体とは相関しないことも示した。臨床指標との関連では、抗Car-huALB抗体陽性RAは抗Car-huALB抗体陰性RAと比較して、Steinbocker stageの進行した症例が多く、また喫煙者が多い傾向にあった。カルバミル化は喫煙者の肺や炎症局所でおこるとされていることから、タバコがRAのリスク因子であることとも一致し、また慢性炎症局所でカルバミル化アルブミンが生成され、新規エピトープができることから自己抗体が産生されるという機序が想定される。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

抗カルバミル化蛋白抗体の新規対応抗原を発見した。

Strategy for Future Research Activity

アルブミンのカルバミル化が関節リウマチ患者の生体内で起こっているかどうかを質量分析にて確認する。
また、関節リウマチの関節滑膜でカルバミル化が起こっているかどうかを組織染色で確認する。
アルブミンが抗CarP抗体の唯一の対応抗原ではないことから、さらにスクリーニングを進めていき、抗CarP抗体産生機序をより詳細に検討していく。

Research Products

• [Journal Article] ignificant association of periodontal disease with anti-citrullinated peptide antibody in a Japanese healthy population - The Nagahama study. (2015)
  • Author(s): Terao C, Asai K, Hashimoto M, Yamazaki T, Ohmura K, Yamaguchi A, Takahashi K, Takei N, Ishii T, Kawaguchi T, Tabara Y, Takahashi M, Nakayama T, Kosugi S, Sekine A, Fujii T, Yamada R, Mimori T, Matsuda F, Bessho K; Nagahama Study Group.
  • Journal Title: J Autoimmun. Volume: 59 Pages: 85-90
  • DOI: 10.1016/j.jaut.2015.03.002
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Anti-citrullinated peptide/protein antibody (ACPA)-negative RA shares a large proportion of susceptibility loci with ACPA-positive RA: a meta-analysis of genome-wide association study in a Japanese population. (2015)
  • Author(s): Terao C, Ohmura K, Kochi Y, Ikari K, Okada Y, Shimizu M, , Kubo M, Yamada R, Taniguchi A, Yamanaka H, Momohara S, Yamamoto K, Mimori T, Matsuda F.
  • Journal Title: Arthritis Res Ther Volume: 17 Pages: 104
  • DOI: 10.1186/s13075-015-0623-4.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Rheumatoid Factor Is Associated With the Distribution of Hand Joint Destruction in Rheumatoid Arthritis. (2015)
  • Author(s): Terao C, Yamakawa N, Yano K, Markusse IM, Ikari K, Yoshida S, Furu M, Hashimoto M, Ito H, Fujii T, Ohmura K, Murakami K, Takahashi M, Hamaguchi M, Tabara Y, Taniguchi A, Momohara S, Raychaudhuri S, Allaart CF, Yamanaka H, Mimori T, Matsuda F.
  • Journal Title: Arthritis Rheumatol. Volume: 67 Pages: 3113-3123
  • DOI: 10.1002/art.39306.
  • Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Carbamylated Human Albumin Is One of the Target Antigens of Anti-Carbamylated Protein Antibodies (2015)
  • Author(s): Shuichiro Nakabo, Koichiro Ohmura, Kosaku Murakami, Ran Nakashima, Moritoshi Furu, Masahiro Ishikawa, Motomu Hashimoto, Yoshitaka Imura, Naoichiro Yukawa, Hajime Yoshifuji, Hiromu Ito, Takao Fujii and Tsuneyo Mimori,
  • Organizer: American college of rheumatology annual meeting 2015
  • Place of Presentation: San Francisco
  • Year and Date: 2015-11-10
  • Int'l Joint Research