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2016 Fiscal Year Annual Research Report

Development of diagnostic test and analysis of pathogenesis for Johne's disease

Research Project

Project/Area Number 26460650
Research InstitutionTottori University

Principal Investigator

松葉 隆司  鳥取大学, 医学部, 講師 (20304206)

Project Period (FY) 2014-04-01 – 2017-03-31
Keywords細菌感染症 / 診断 / 血清反応 / 組換えタンパク / 抗原
Outline of Annual Research Achievements

Mycobacterium avium subsp. paratuberculosisの経口感染により、牛・羊・山羊など反芻獣に慢性肉芽腫性腸炎をおこす家畜法定伝染病のヨーネ病は、診断・淘汰により防疫対策が実施されている。診断には臨床症状、糞便材料を用いた菌培養および菌遺伝子検出と、免疫応答を検出する血清抗体スクリーニング等により行われる。菌培養は時間を要し、遺伝子検査は高感度で特異性高いが生死菌の区別がつかない。また現行の免疫学的検査法は、ヨーネ菌の粗抽出抗原を用いるため環境細菌である近縁種等に対する交差反応等で偽陽性出やすいため、より特異性や感度の高い抗原が求められる。一方ヨーネ菌感染において宿主免疫反応抑制に関する報告があるが、宿主免疫反応と病態についての詳細は解明されていない。本研究では、生命情報解析によるヨーネ菌特異遺伝子抗原検索とスクリーニングを行い、選抜抗原遺伝子の組換えタンパク発現・精製、実験感染牛血清を用いた反応性解析を行った。さらに、野外牛血清を用いた反応性検討、特異性と感度向上のための条件検討を試みた。その結果、免疫牛血清が著明に反応する3抗原遺伝子を選抜し、各組換えタンパク発現系から精製タンパクを得た。実験感染牛より経時採取した血清抗体の各精製タンパクに対する反応性は、糞便からの菌遺伝子検出結果や培養陽性結果に対応する著明な反応性上昇を示した。病態進行の早い実験感染個体ではIgM反応性良好だがIgG反応性上昇は認められなかった結果は、クラススイッチした抗体産生抑制と病態進行とが関連する可能性を示す。野外牛血清を用いた抗体反応性検討では、菌遺伝子検出や既存のスクリーニング検査結果との不一致も認められたため、更なる検討を要する。

  • Research Products

    (4 results)

All 2017 2016

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 1 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] Evaluation of in-house loop-mediated isothermal amplification for tuberculosis diagnosis in comparison with Xpert MTB/RIF.2017

    • Author(s)
      Habeenzu C, Nakajima C, Solo E, Bwalya P, Kajino, K, Miller M, Kurosawa Y, Mudenda V, Kasonka L, Suzuki Y, Matsuba T
    • Journal Title

      J. Infect. Dev. Ctries.

      Volume: 印刷中 Pages: 印刷中

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Difference in antibody rsponses to Mycobacterium tuberculosis antigens in Japanese tuberculosis patients infected with the Beijing/non-Beijing genotype.2017

    • Author(s)
      Zhao J, Shiratori B, Okumura M, Yanai H, Matsumoto M, Nakajima C, Mizuno K, Ono K, Oda T, Chagan-Yasutan H, Ashino Y, Matsuba T, Yoshiyama T, Suzuki Y, Hattori T
    • Journal Title

      J. Immunol. Res.

      Volume: 2017 Pages: 12pages

    • DOI

      https://doi.org/10.1155/2017/4797856

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] ヨーネ菌組換え抗原タンパクに対する実験感染牛の血清抗体反応性2017

    • Author(s)
      松葉隆司,永田礼子,川治聡子,中島千絵,鈴木定彦,藤井潤
    • Organizer
      第90回日本細菌学会総会
    • Place of Presentation
      仙台国際センター(宮城県・仙台市)
    • Year and Date
      2017-03-19 – 2017-03-21
  • [Presentation] ヨーネ菌特異抗原の探索と 組換えタンパクへの血清反応性2016

    • Author(s)
      松葉隆司,永田礼子,川治聡子
    • Organizer
      第47回結核・非定型抗酸菌症治療研究会
    • Place of Presentation
      笹川会館(東京都・港区)
    • Year and Date
      2016-12-04

URL: 

Published: 2018-01-16  

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