2014 Fiscal Year Research-status Report
In vivo パッチクランプ法による鍼灸鎮痛メカニズムの解明
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26460711
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| Research Institution | Kansai University of Health Sciences |
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Principal Investigator |
西尾 尚子 関西医療大学, 保健医療学部, 準研究員 (40648359)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷口 亘 関西医療大学, 保健医療学部, 准教授 (20453194)
中塚 映政 関西医療大学, 保健医療学部, 客員教授 (30380752)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | patch-clamp / 鍼灸 / 疼痛抑制 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
鍼灸による脊髄レベルの鎮痛メカニズムを調べるために、神経障害性疼痛モデルラットにin vivoパッチクランプ法を用いて脊髄後角細胞の抑制性シナプス伝達に与える影響の解析を行った。神経障害性疼痛モデルにはSpared nerve injury(SNI)モデルを用いた。右側の脊髄膠様質細胞から、0mVに電位固定し抑制性シナプス後電流（IPSC)を観察し、右後肢の崑崙(BL60)相当部位(外踝とアキレス腱の間)に対し、鍼を垂直に刺入した。鍼は、皮内針(線経0.12,鍼長3mm)を使用した。鍼刺激によるIPSCは、5ニューロン中4ニューロンに発生頻度の著名な増加を認めたが振幅には、有意な増加は認められなかった。本研究の結果から、SNIモデルへの鍼刺激は脊髄後角ニューロンのIPSCの頻度を増加させることが示された。これは、末梢からの疼痛刺激に対する脊髄後角ニューロンの興奮性を抑制すること、すなわち鎮痛効果を有することを示唆する結果である。IPSCは抑制性ニューロンから抑制性伝達物質であるgamma-aminobutyric acid (GABA)、グリシンの放出により発生するが、末梢における鍼刺激がどのような機序によって、これらの放出を増強させるのかは不明である。下行性疼痛抑制系の賦活等が考えられるが、今後のさらなる検討課題である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
手技上難易度が高いIn vivo パッチクランプ法を習得した上で、SNIモデルラットにおいて鍼刺激が脊髄膠様質細胞のIPSCの頻度を増加させることを確認した。このことは、鍼灸刺激が抹消からの疼痛刺激に対する脊髄後角ニューロンの興奮性を抑制すること、すなわち鎮痛効果を有することを示唆する結果である。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は引き続き脊髄膠様質細胞にIn vivo パッチクランプ法を適用し、鍼灸刺激が興奮性シナプス伝達に与える影響を解析する。具体的には－70mVの電位固定で興奮性シナプス後電流（EPSC)の変化を記録する。その上で鍼灸刺激方法、鍼灸刺激部位の違いにおいてIPSC、EPSCの変化に差があるか検討する。また鍼灸刺激効果は下降性抑制系の賦活化によるものと推察しているため、種々の抑制性に関連するイオンチャネルの特異的拮抗薬を脊髄に灌流させることにより鍼灸刺激効果のメカニズムを薬理学的に分析する。
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| Causes of Carryover |
研究状況の変化のため、研究備品未購入のものがあるため
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
主にラット、試薬、ガラス電極、鍼などデータ取得に必要な消耗品に使用予定。また研究結果に応じて国内外での学会発表等に使用予定である。
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[Presentation] 活性酸素種による脊髄後角TRPA1, TRPV1を介した興奮性シナプス伝達増強の作用機序2014
Author(s)
西尾尚子, 谷口亘, 山中学, 曽根勝真弓, 阿部唯一, 峰巨, 筒井俊二, 橋爪洋, 山田宏, 中塚映政, 吉田宗人
Organizer
第43回日本脊椎脊髄病学会学術集会
Place of Presentation
京都
Year and Date
2014-04-17 – 2014-04-19
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