2015 Fiscal Year Research-status Report
p53ファミリーに制御される非コードRNAと消化器発がん：分子標的としての可能性
| Project/Area Number |
26460944
|
|---|
| Research Institution | Sapporo Medical University |
|---|
Principal Investigator |
佐々木 泰史 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (70322328)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | p53 / p73 / p63 / 消化器がん / 非コードRNA |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
p53は，ヒトがんにおいて最も高頻度に遺伝子変異が検出されているがん抑制遺伝子であり，標的遺伝子の発現制御を行うことで腫瘍抑制機能を発揮している．一方，最近のゲノム解析の進展により，転写されたRNAの多くがタンパクに翻訳されない非コードRNA (ncRNA，miRNA)であり，遺伝子発現の様々な段階で重要な制御因子として機能することが明らかになってきた．本研究ではp53とそのファミリーであるp63・p73によって発現が制御される非コードRNAに着目し，特にがんの浸潤・転移との関わりを解析することにより，診断・治療への応用を試みる．
p53誘導性miRNA，miR-200b/200c/429の新規標的遺伝子としてCRKLを同定した．CRKL遺伝子の3’-UTRにmiR-200b/200c/429の結合配列を同定し，p53ファミリーがmiR-200b/200c/429を転写活性化し，この配列を介してCRKLの発現を抑制していることを示した．臨床検体の解析から，CRKL遺伝子発現が胃癌組織で上昇し，予後不良と相関することをつきとめた．また，p53変異のある症例で有意にCRKLが発現上昇していた．CRKLの導入により，胃癌細胞株の増殖，浸潤，遊走能が上昇することを明らかにした．これらの結果から，p53ファミリーがmiR-200b/200c/429の転写誘導を介してCRKLの発現を制御し，がんの浸潤，転移能を抑制していることが示唆された．この成果はCancer Science誌に掲載された．（CRKL oncogene is downregulated by p53 through miR-200s. Cancer Sci 2015;106:1033-40）
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
p53誘導性miRNA，miR-200b/200c/429の新規標的遺伝子としてCRKLを同定し，発がん抑制との関わりを解析した．さら臨床検体の解析から，CRKL遺伝子発現が胃癌組織で上昇し，予後不良と相関することをつきとめ，治療，予後のマーカーとなり得ることを明らかにした．この成果はCancer Science誌に掲載された．さらにp53ファミリーに制御される複数の新規miRNAを同定し，解析を進めている．
|
| Strategy for Future Research Activity |
p53ファミリーに制御される非コードRNAとその標的分子は，発がん，がんの進展に関与している可能性がある．さらにその発現はがん組織で変化している可能性が高く，予後，治療効果と相関していることが推測される．p53ファミリーに制御される複数の新規非コードRNAをすでに複数同定しており，今後は機能解析，発現解析を進め，バイオマーカーとしての有用性を検討していく．
|
| Causes of Carryover |
p53ファミリーに制御される非コードRNAの発現解析に使用するプライマー，プローブ，酵素の多くは前年度に購入したものが使用できた．また4種類の抗体を購入する予定であったが，2種類については，他の研究者から供与いただけたため，物品費の節約が可能であった．一方で，2015年アメリカ癌学会（4月 フィラデルフィア）で研究成果の発表を行ったため，旅費がやや高くなった．最終的に全エンドの繰り越しを含め，82万円あまりの次年度使用額が生じた．
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
すでに施行済みのmiRNAの次世代シークエンサー解析，およびp53結合コンセンサス配列の全ゲノム網羅的解析から，p53に制御される非コードRNAの候補を同定している．次年度使用額が生じたことにより，数多くの候補RNAの分析が可能となった．具体的には細胞実験による発現・転写制御の解析に加えて，がん症例（胃癌，食道癌）における発現実験も計画する．さらに血漿中の発現を解析するシステムの構築も試みる．さらにアメリカ癌学会での成果報告も計画している．
細胞レベルでの発現・転写解析のための試薬類（酵素類15万円，リアルタイムPCR試薬30万円，抗体20万円） 臨床検体でのRNA発現解析のための試薬類（酵素類15万円，RNAプローブ40万） 学会出張旅費35万円（2016年アメリカ癌学会） 謝金40万円
|
Research Products
(18 results)
-
-
-
-
[Journal Article] Epigenetic silencing of NTSR1 is associated with lateral and noninvasive growth of colorectal tumors.2015
Author(s)
Kamimae S, Yamamoto E, Kai M, Niinuma T, Yamano HO, Nojima M, Yoshikawa K, Kimura T, Takagi R, Harada E, Harada T, Maruyama R, Sasaki Y, Tokino T, Shinomura Y, Sugai T, Imai K, Suzuki H
-
Journal Title
Oncotarget
Volume: 6
Pages: 29975-90
DOI
Peer Reviewed / Open Access
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] Comprehensive genomic analyses of oral squamous cell carcinoma tissues by semiconductor-based next-generation sequencing2015
Author(s)
Nakagaki T, Sasaki Y, Kobashi K, Takeda K, Tamura M, Ohashi T, Ogi K, Idogawa M, Hiratsuka H, Tokino. T
Organizer
American Association of Cancer Research (AACR) annual meeting 2015
Place of Presentation
Pennsylvania, USA
Year and Date
2015-04-18 – 2015-04-22
Int'l Joint Research
-
-
-
[Presentation] The effect of forced expression of k-ras mutation on gastrointestinal cancer cells and IGF-IR targeting therapy2015
Author(s)
Adachi Y, Matsunaga Y, Sasaki Y, Nosho K, Yamamoto Y, Arimura Y, Endo T, Kato Y, Tokino T, Carbone DP, Shinomura Y
Organizer
American Association of Cancer Research (AACR) annual meeting 2015
Place of Presentation
Pennsylvania, USA
Year and Date
2015-04-18 – 2015-04-22
Int'l Joint Research
