2016 Fiscal Year Annual Research Report
The role of mTORC2-SPARC pathway in the pathogenesis of pulmonary fibrosis
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26461202
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| Research Institution | Nippon Medical School |
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Principal Investigator |
吾妻 安良太 日本医科大学, 医学部, 教授 (10184194)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
神尾 孝一郎 日本医科大学, 医学部, 助教 (20465305)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | mTORC2 / XPLN / SPARC / 肺線維芽細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
mTORには構成されるコンポーネントの違いにより、mTORC1 (以下C1)とmTORC2（以下C2）の二つがあるが、C2と線維化病態との関連が推測されるものの、C2に特異的な阻害剤は利用できないため、我々は内因性のC2阻害ペプチドであるXPLNに着目して、ヒト肺線維芽細胞を用いてC2と線維化に関与するメディエーターとの関連を検討した。
まずXPLNに対するsiRNAを用いてノックダウンを行った。これによりC2が活性化され、AktのS473のリン酸化に伴い線維化のメディエーターであるSPARCの発現が増強することが、mRNA及び蛋白レベル、さらに免疫染色で確認された。SPARCの下流にあるhydrogen peroxideも増加した。このSPARCの発現増強は、C1 inhibitorであるrapamycinでは抑制されなかったが、dual mTOR inhibitorであるpp242では抑制され、C2の関与が確認された。またTGF-b1によりSPARCの発現が増強することが知られているが、TGF-b1によるXPLNのdown-regulationが確認され、これによるC2の活性化がSPARC発現の増強に繋がることが示唆された。この経路には、Smad pathwayが関与していた。
単球系細胞株でHDAC inhibitor (HDACi)によるXPLNの発現増強が報告されているため、ヒト肺線維芽細胞でも検討した所、濃度依存性にXPLNの発現が増強することが確認された。HDACiで前処理した線維芽細胞にTGF-b1を作用させた所、SPARCの発現は有意に抑制された。
さらにC1の抑制により、C2に対するnegative feedback loopが抑制されSPARCの発現増強が見られた。またC1抑制が、XPLNの発現増強を惹起することを見出した。
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[Journal Article] XPLN is modulated by HDAC inhibitors and negatively regulates SPARC expression by targeting mTORC2 in human lung fibroblasts2017
Author(s)
Koichiro Kamio, Arata Azuma, Jiro Usuki, Kuniko Matsuda, Minoru Inomata, Nobuhiko Nishijima, Shioto Itakura, Hiroki Hayashi, Takeru Kashiwada, Nariaki Kokuho, Kenichiro Atsumi, Tomoyoshi Yamaguchi, Kazue Fujita, Yoshinobu Saito, Shinji Abe, Kaoru Kubota, Akihiko Gemma
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Journal Title
Pulmonary Pharmacology & Therapeutics
Volume: 44
Pages: 61-69
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] XPLN Negatively Regulates SPARC Expression by Targeting mTORC2 in Human Lung Fibroblasts2016
Author(s)
Koichiro Kamio, Arata Azuma, Jiro Usuki, Kuniko Matsuda, Minoru Inomata, Nobuhiko Nishijima, Shioto Itakura, Nariaki Kokuho, Hiroki Hayashi, Tomoyoshi Yamaguchi, Kazue Fujita, Yoshinobu Saito, Shinji Abe, Kaoru Kubota, Akihiko Gemma
Organizer
American Thoracic Society
Place of Presentation
米国サンフランシスコ
Year and Date
2016-05-14 – 2016-05-17
Int'l Joint Research
