2014 Fiscal Year Research-status Report
糸球体足細胞傷害におけるギャップ結合タンパクconnexin43の役割
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26461219
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| Research Institution | University of Yamanashi |
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Principal Investigator |
姚 建 山梨大学, 総合研究部, 准教授 (50303128)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 腎臓 / 糸球体 / 足細胞 / ギャプ結合 / コネキシン43 / TXNIP / 酸化ストレス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ギャップ結合構成蛋白コネキシン43は、細胞機能調節に重要な役割を果たしている。しかしコネキシン43は腎糸球体の足細胞の傷害に関与しているか、さらに関与しているとしたらどのような分子メカニズムを介して影響しているのか不明である。本研究は、足細胞傷害におけるコネキシン43の役割及び作用機構を解明することである。26年度に得られた結果は以下の通りである。
1. 培養マウス足細胞にコネキシン43が発現していることを免疫染色およびウェスタンblotで明らかにした。足細胞のコネキシン43が、主に核の周辺に局在し、機能的な細胞間ギャップ結合チャネルを形成していなかったことをdye-transfer実験で、明らかにした。
2. 酸化ストレス刺激によってマウス足細胞のコネキシン43の発現量が増加し、酸化ストレスによる細胞死と深くかかわっていることが観察された。ギャップ結合の阻害剤を添加することで、酸化ストレスによるP38の活性化および足細胞のapoptosisが抑制された。
3. ギャップ結合の阻害剤が、足細胞のTXNIPの発現量を強く抑制した。結果として、抗酸化分子であるthioredoxinが活性化されることで、P38のの活性化を抑制し、細胞死を抑えることとなった。
以上の結果から、コネキシン43が酸化ストレスによる足細胞の細胞傷害に深くかかわることが明らかになった。コネキシン43が、抗酸化分子thioredoxinの抑制物質であるTXNIPを調節していることを初めて発見した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究は計画通り進んでいる。26年度の研究結果から、培養足細胞のコネキシン43は、酸化ストレスによる腎糸球体足細胞の傷害に深く関わることが明らかになった。このことにより、次年度には、コネキシン43のレベルを調節することで、マウス体内の糸球体傷害による蛋白尿の形成への影響を検討することに繋がる根拠が得られた。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度には、マウス体内足細胞の傷害にコネキシン蛋白がどのように発現しているか、また発現レベルを調節することで尿蛋白および糸球体傷害に対してどのように影響しているか明らかにしたい。具体的には、糸球体足細胞傷害モデルを作成し、糸球体傷害組織におけるコネキシン発現レベルを検討する。糸球体傷害となったマウス及びラットの尿、血清、腎組織を採取し、血清BUN、クレアチニンおよび尿蛋白レベルを測定し、コネキシン43の発現レベルと糸球体足細胞の傷害程度の関係について検討する。
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| Causes of Carryover |
年度末および年始の間に（３月２７日～４月３日）ボストンで開催されたアメリカ実験生物学会の参加費用として計画したため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
年度末および年始の間に（３月２７日～４月３日）ボストンで開催されたアメリカ実験生物学会の旅費・宿泊費として使用する予定です。
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