2017 Fiscal Year Annual Research Report
Research about S-nitrosylation of proteins related to pathogenesis of Parkinson's disease
| Project/Area Number |
26461277
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
小澤 健太郎 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (80507393)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉栖 正典 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (60294667)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
|
| Keywords | 一酸化窒素 / パーキンソン病 / ミトコンドリア |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
孤発性パーキンソン病の発症機序の解明および新規治療法の開発のため、一酸化窒素（NO）による家族性パーキンソン病原因タンパク質parkinへの修飾が、ミトコンドリア機能に与える影響を評価するための細胞株を樹立することを目的とする。今年度は内在性のPARK2遺伝子にゲノム編集技術を用いて変異を入れ、NOにより修飾を受けないparkinを発現する細胞株を作成した。樹立した細胞株はサザンブロット法とサンガー法によるDNAシーケンスにより変異の挿入を確認した。樹立した細胞株はミトコンドリアのオートファジー機構による分解は認めなかったものの、ミトコンドリア刺激に対して脆弱性を認めた。また家族性パーキンソン病発症の関連遺伝子であるDJ-1をKOした細胞株を樹立したところ、parkinのNO修飾がおこらなくなった。さらにDJ-1のKO細胞に薬剤によるミトコンドリア負荷を与えたところ、parkinの変異細胞と同様にミトコンドリアストレスに対して脆弱性を持っていることが明らかになった。さらに我々はDJ-1のノックアウトマウスの脳を用いて実験を行ったが、DJ-1のKOマウスの脳組織においても、parkinのNO修飾はおこっていなかった。さらに我々はparkinの変異細胞、DJ-1のKO細胞において細胞代謝測定機器によりミトコンドリアの呼吸鎖の機能を評価したが、これらの変異細胞と野生型細胞の間にミトコンドリア代謝、解糖系の代謝の差は認められなたかった。このことはDJ-1がparkinのNO修飾を介してパーキンソン病発症に関わっている可能性を示すもので、パーキンソン病に対する新しい治療に結びつくと考えられた。
|
