概日時計リズムと選択的スプライシング異常によるメタボリック症候群発症病態の解明

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26461353
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 佐藤 哲郎 群馬大学, 医学部附属病院, 講師 (40302484)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 白色脂肪細胞 / precursor mRNA / 選択的スプライシング / THRAP3 / エキソンアレイ / 3T3-L1細胞

Outline of Annual Research Achievements

白色脂肪細胞分化過程におけるprecursor messenger RNA (pre-mRNA)の選択的スプライシングの重要性を網羅的に検討する目的で、私達が以前同定した転写共役因子PDIP1に会合するスプライシング因子THRAP3 (Katano-Toki A, et al. Mol Endocrinol 2012)に対するshort interfering RNAをエレクトロポレーション法で導入し、分化誘導因子添加後4日目にtotal RNAを抽出し、Affimetrix社マウスエキソンアレイを用いて解析を行った。その結果、THRAP3ノックダウンにより、splicing indexが3以上に増加するexon数が約600個 (遺伝子数約400)が同定され、逆にsplicing indexが3未満に減少するexonが約800個 (遺伝子数約600)が同定された。このうち、大変動しているエキソン群についてRT-PCR法を用いて実際にスプライシング変化が起こっているか検証を行った。またエキソンアレイデータのGene ontology解析を行い、機能的にどのような遺伝子群のスプライシングに多く変化が起こっているか検証を行った。以上の成績より、3T3-L1脂肪細胞分化過程においてTHRAP3が多くの遺伝子の転写のみならず、選択的スプライシングを調節して脂肪細胞分化を制御する可能性が示唆された。現在、内因性スプライシング因子を臓器特異的に欠損する遺伝子改変マウスの作成を進めており、樹立に成功すれば脂肪細胞分化におけるスプライシング因子の生体内における機能解析が可能となる。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

前年度実施報告書に記載した研究内容に関して、研究をおおむね遂行し、次年度研究に向けてスプライシング因子欠損マウスの作成も順調である。

Strategy for Future Research Activity

今後更なる3T3-L1細胞エキソンアレイ解析データの検証および同定された標的遺伝子の選択的スプライシングミニ遺伝子の構築とそのスプライシング解析を行う。更に脂肪細胞特異的にスプライシング因子を欠損した遺伝子改変マウスを用いて、白色脂肪細胞分化や機能における当該選択的スプライシング因子の生理学的な重要性についてin vinoにおける解析を進める。

Causes of Carryover

2014年度使用予定額の一部が2015年度に繰り越したため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

翌年度分として請求した助成金と合わせて2016年度は、主に臓器特異的選択的スプライシング因子欠損マウスを用いたin vivo解析に必要な消耗品費およびエキソンアレイ解析費として使用予定である。

Research Products

• [Journal Article] GNAS mutation in adrenal aldosterone-producing adenomas. (2016)
  • Author(s): Nakajima Y, Okamura T, Horiguchi K, Gohko T, Miyamoto T, Satoh T, Ozawa A, Ishii S, Yamada E, Hashimoto K, Okada S, Takata D, Horiguchi J, Yamada M
  • Journal Title: Endocr J Volume: 63 Pages: 199-204
  • DOI: 10.1507/endocrj. EJ15-0642
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Changes in visceral and subcutaneous fat mass in patients with pheochromocytoma. (2015)
  • Author(s): Okamura T, Nakajima Y, Satoh T, Hashimoto K, Sapkota S, Yamada E, Okada S, Fukuda J, Higuchi T, Tsushima Y, Yamada M
  • Journal Title: Metabolism Volume: 64 Pages: 706-712
  • DOI: 10.1016/j.metabol.2015.03.004
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Treatment and management of thyroid storm: analysis of the nationwide surveys: The task force committee of the Japan Thyroid Association and Japan Endcorine Society for the establishment of diagnostic criteria and nationwide surveys for thyroid storm. (2015)
  • Author(s): Isozaki O, Satoh T, Wakino S, Suzuki A, Iburi T, Tsuboi K, Kanamoto N, Otani H, Furukawa Y, Teramukai S, Akamizu T
  • Journal Title: Clin Endocrinol Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • DOI: 10.1111/cen. 12949.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] NR4A1を介する新たな甲状腺ホルモンによるTSHβ遺伝子の制御機構の発見 (2015)
  • Author(s): 岡村孝志、中島康代、堀口和彦、松本俊一、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、橋本貢士、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第58回日本甲状腺学会学術集会
  • Place of Presentation: 福島県文化センター（福島）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-07
• [Presentation] TRHと甲状腺ホルモンの膵島遺伝子発現への作用 (2015)
  • Author(s): 渋沢信行、岡村孝志、渡邊琢也、堀口和彦、松本俊一、中島康代、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、佐藤哲郎、森昌朋、山田正信
  • Organizer: 第58回日本甲状腺学会学術集会
  • Place of Presentation: 福島県文化センター（福島）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-07
• [Presentation] 潜在性甲状腺機能異常とCKD 人間ドック15,643名の解析から (2015)
  • Author(s): 中島康代、阿久沢まさ子、石井角保、佐藤哲郎、橋本貢士、根岸真由美、下村洋之助、小林功、安藤義孝、山田正信
  • Organizer: 第58回日本甲状腺学会学術集会
  • Place of Presentation: 福島県文化センター（福島）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-07
• [Presentation] マウス胎児由来視床下部神経細胞株を用いたTRH遺伝子の甲状腺ホルモンによるnegatve feedback機構の解析 (2015)
  • Author(s): 高見澤哲也、佐藤哲郎、登丸琢也、土岐明子、吉野聡、錦戸彩加、渡邊琢也、岡村孝志、堀口和彦、松本俊一、中島康代、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、石塚高広、森昌朋、山田正信
  • Organizer: 第58回日本甲状腺学会学術集会
  • Place of Presentation: 福島県文化センター（福島）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-07
• [Presentation] 下垂体細胞株におけるNcoR･Rev-erbαによる概日リズム遺伝子発現制御の解析 (2015)
  • Author(s): 松本俊一、堀口和彦、中島康代、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、岡田秀一、Wondisford FE、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第58回日本甲状腺学会学術集会
  • Place of Presentation: 福島県文化センター（福島）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-07
• [Presentation] THRAP3は核内受容体による転写に共役したprecursor mRNA選択的スプライシングを調節する (2015)
  • Author(s): 佐藤哲郎、登丸琢也、土岐明子、吉野聡、高見澤哲也、錦戸彩加、渡邊琢也、岡村孝志、堀口和彦、松本俊一、中島康代、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、森昌朋、山田正信
  • Organizer: 第58回日本甲状腺学会学術集会
  • Place of Presentation: 福島県文化センター（福島）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-07
• [Presentation] TSH産生下垂体腫瘍におけるGPR101遺伝子変異･発現解析 (2015)
  • Author(s): 堀口和彦、Sapkota S, 松本俊一、中島康代、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、佐藤哲郎、登坂雅彦、山田正三、山田正信
  • Organizer: 第58回日本甲状腺学会学術集会
  • Place of Presentation: 福島県文化センター（福島）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-07
• [Presentation] 高見澤哲也、佐藤哲郎、登丸琢也、土岐明子、吉野聡、石塚高広、錦戸彩加、渡邊琢也、岡村孝志、松本俊一、堀口和彦、中島康代、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、森昌朋、山田正信 (2015)
  • Author(s): THRAP3はPPARγによるprecursor mRNA選択的スプライシング調節に関与する
  • Organizer: 第36回日本肥満学会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2015-10-02 – 2015-10-04
• [Presentation] Tumor necrosis factor (TNF)-α modulates precursor mRNA alternative splicing by peroxisome proliferator-activated receptor γ (2015)
  • Author(s): Satoh T, Takamizawa T, Tomaru T, Katano-Toki A, Yoshino S, Nishikido A, Watanabe T, Okamura T, Horiguchi K, Matsumoto S, Nahkajima Y, ishii S, Ozawa A, Shibusawa N, Mori M, Yamada M
  • Organizer: The 8th Asia-Oseania Conference on Obesity
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2015-10-02 – 2015-10-04
• [Presentation] Thyrotropin-releasing hormone affects the gene expression of the pancreatic islet. (2015)
  • Author(s): Shibusawa N, Matsumoto S, Nakajima Y, Tomaru T, Ishii S, Ozawa A, Satoh T, Mori M, Yamada M
  • Organizer: The 8th Asia-Oseania Conference on Obesity
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2015-10-02 – 2015-10-04
• [Presentation] Depletion of COUP-TF II in childhood attenuates rapid weight again and hyperglycemia in db/db mice. (2015)
  • Author(s): Ishii S, Ozawa A, Satoh T, Tsai SY, Tsai MJ, Yamada M
  • Organizer: The 8th Asia-Oseania Conference on Obesity
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2015-10-02 – 2015-10-04
• [Presentation] Cold-induced adaptive thermogenesis in brown adipose tissue requires regulation by thyrotropin-releasing hormone (TRH). (2015)
  • Author(s): Ozawa A, Watanabe T, Katano-Toki A, Horiguchi K, Matsumoto S, Nakajima Y, Tomaru T, ishii S, Sibusawa N, Okada S, Mori M, Yamada M
  • Organizer: The 8th Asia-Oseania Conference on Obesity
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2015-10-02 – 2015-10-04
• [Presentation] HELZ2 negatively regulates transcription of mouse leptin receptor gene in hepatocytes. (2015)
  • Author(s): Tomaru T, Satoh T, Yoshino S, Katano-Toki A, Okamura S, Ishizuka T, Horiguchi K, ishii S, Nakajima Y, Ozawa A, Shibusawa N, Hashimoto K, Okada S, sasaki T, kitamura T, Mori m, Yamada M
  • Organizer: The 8th Asia-Oseania Conference on Obesity
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2015-10-02 – 2015-10-04
• [Presentation] 癌抑制蛋白meninと転写因子JunDの共役結合破綻が膵神経内分泌細胞に与える影響 (2015)
  • Author(s): 小澤厚志、渡邊琢也、堀口和彦、松本俊一、登丸琢也、石井角保、渋沢信行、岡田秀一、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第42回日本神経内分泌学術集会
  • Place of Presentation: 仙台市戦災復興記念館（仙台）
  • Year and Date: 2015-09-18 – 2015-09-19
• [Presentation] 多発性内分泌腫瘍症１型１（MEN1)モデルマウスにおける耐糖能の解析 (2015)
  • Author(s): 渡邊琢也、小澤厚志、堀口和彦、松本俊一、登丸琢也、石井角保、渋沢信行、岡田秀一、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第42回日本神経内分泌学術集会
  • Place of Presentation: 仙台市戦災復興記念館（仙台）
  • Year and Date: 2015-09-18 – 2015-09-19
• [Presentation] 蛸足細胞におけるインスリン抵抗性の機序 (2015)
  • Author(s): 岡田秀一、斎藤従道、山田英二郎、多賀谷裕子、大崎綾、下田容子、佐藤哲郎、渋沢良、木暮晃一郎、山田正信
  • Organizer: 第58回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: シーモンパレス（下関）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-24
• [Presentation] 近位尿細管株における高濃度グルコース暴露による小胞体ストレス応答とそれに対するDapaglifrozinの役割 (2015)
  • Author(s): 多賀谷裕子、山田英二郎、澁澤 良、大崎綾、下田容子、斎藤従道、木暮晃一郎、前嶋明人、佐藤哲郎、岡田秀一、山田正信
  • Organizer: 第58回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: シーモンパレス（下関）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-24
• [Presentation] Tctex1d2は脂肪細胞におけるインスリン抵抗性誘導分子である (2015)
  • Author(s): 下田容子、斎藤従道、山田英二郎、多賀谷裕子、大崎綾、佐藤哲郎、山田正信、澁澤良、木暮晃一郎
  • Organizer: 第58回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: グランプラス セント･ヴァレンタイン（下関）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-24
• [Presentation] 長期TNFα刺激によるAMPキナーゼ調節機構の解明 (2015)
  • Author(s): 山田英二郎、岡田秀一、澁澤良、多賀谷裕子、大崎綾、下田容子、斎藤従道、木暮晃一郎、佐藤哲郎、大島喜八、森昌朋、山田正信
  • Organizer: 第58回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: パシフィックビーナス（下関）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-24
• [Presentation] THRAP3はPPARγによるprecursor mRNA選択的スプライシング調節に関与する (2015)
  • Author(s): 佐藤哲郎、登丸琢也、土岐明子、吉野聡、石塚高広、錦戸彩加、渡邊琢也、岡村孝志、松本俊一、堀口和彦、中島康代、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、森昌朋、山田正信
  • Organizer: 第58回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: 下関市民会館（下関）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-24
• [Presentation] 多発性内分泌腫瘍症１型(MEN1)モデルマウスにおける耐糖能異常 (2015)
  • Author(s): 渡邊琢也、小澤厚志、堀口和彦、松本俊一、中島康代、登丸琢也、石井角保、渋沢信行、岡田秀一、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第58回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: シーモールパレス（下関）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-24
• [Presentation] TRH遺伝子欠損マウス耐糖能障害に関する膵島遺伝子発現の変化 (2015)
  • Author(s): 渋沢信行、堀口和彦、松本俊一、中島康代、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、岡田秀一、佐藤哲郎、森昌朋、山田正信
  • Organizer: 第58回日本糖尿病学会年次学術集会
  • Place of Presentation: シーモールパレス（下関）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-24
• [Presentation] THRAP3はPPARγによるprecursor mRNA選択的スプライシング調節に関与する (2015)
  • Author(s): 佐藤哲郎、登丸琢也、土岐明子、吉野 聡、石塚高広、錦戸彩加、渡邊琢也、岡村孝志、松本俊一、堀口和彦、中島康代、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、森 昌朋、山田正信
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] 下垂体細胞株を用いたThsb遺伝子における概日リズム発現制御の解明 (2015)
  • Author(s): 松本俊一、橋本貢士、佐藤哲郎、Wondisford F、山田正信
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] NR4A1を介するTSHβ遺伝子の甲状腺ホルモンによる制御機構 (2015)
  • Author(s): 岡村孝志、中島康代、堀口和彦、松本俊一、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、渋沢信行、橋本貢士、岡田秀一、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] 近位尿細管細胞株HK-2細胞におけるFynによる新たなオートファジー調節機構の解析 (2015)
  • Author(s): 山田英二郎、多賀谷裕子、渋澤良、下田容子、斎藤従道、佐藤哲郎、岡田秀一、山田正信
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] 各種コルチゾール産生腫瘍におけるPPKACA遺伝子変異の検討 (2015)
  • Author(s): 中島康代、岡村孝志、堀口和彦、松本俊一、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、渋澤信行、橋本貢士、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] 多発性内分泌腫瘍症(MEN)1型と類縁疾患におけるCDK変異の検討 (2015)
  • Author(s): 堀口和彦、松本俊一、中島康代、登丸琢也、石井角保、小澤厚志、渋澤信行、佐藤哲郎、山田正信、Marx S
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] 膵β細胞におけるmeninの機能解析 (2015)
  • Author(s): 小澤厚志、渡邊琢也、堀口和彦、松本俊一、中島康代、登丸琢也、石井角保、渋澤信行、岡田秀一、佐藤哲郎、山田正信
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] 膵島FGF21遺伝子発現における甲状腺ホルモンの作用に関する検討 (2015)
  • Author(s): 渋澤信行、渡邊琢也、岡村孝志、土岐明子、堀口和彦、松本俊一、中島康代、登丸琢也、石井角保、小澤厚、佐藤哲郎、森昌朋、山田正信
  • Organizer: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京（東京）
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25