遺伝性リンパ増殖症の新たな診断法の開発と病態解析

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26461570
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 金兼 弘和 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (00293324)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 廣野 恵一 富山大学, 大学病院, 助教 (80456384)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: X連鎖リンパ増殖症候群 / 自己免疫性リンパ増殖症候群 / SH2D1A / XIAP / NRAS / ZAP70

Outline of Annual Research Achievements

1）ダブルネガティブT細胞の増加を伴うALPS類縁疾患患者を対象として全エキソーム解析を行い、NRASの体細胞変異を同定し、RAS関連ALPS様疾患であると診断した（J Clin Immunol 2015; 35: 454-8）。
2）女児例を含む血球貪食性リンパ組織球症の1家系を対象に全エキソーム解析を行い、XIAP変異を同定した。X染色体の異常な不活化による女性XIAP欠損症であることを証明した（J Clin Immunol 2015; 35: 244-8）。
3）原因不明の複合免疫不全症の患者さんを対象に全エキソーム解析を行い、X連鎖複合免疫不全症（SCID）の原因遺伝子であるIL2RG変異を同定した。患者では体細胞モザイクを有しており、そのことがSCIDと異なり、乳児期以降の発症と関係していたものと考えられた（J Clin Immunol 2015; 35: 610-4）。
4）X連鎖劣性遺伝形式を有する低ガンマグロブリン血症の1家系を対象に全エキソーム解析を行い、SH2D1A変異を同定し、XLP1（SAP欠損症）と診断した。フローサイトメトリーでメモリーT細胞の一部にSAP陽性細胞を認め、体細胞モザイク例であった。さらにSAP陽性細胞が機能的に正常であることを証明し、臨床症状の軽症化に関わっていると考えられた（投稿中）。
5）致死的EBウイルス関連リンパ増殖症を呈した女児例を対象に全エキソーム解析を行い、ZAP70変異を同定した（投稿中）。ZAP70欠損症は通常SCIDを発症するが、今回同定した変異は部分的機能低下型の変異であることを証明した（投稿中）。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

従来のフローサイトメトリーならびにサンガー法による遺伝子解析では原因遺伝子の同定が困難であった非典型的リンパ増殖症を対象に全エキソーム解析を行い、複数の患者で原因遺伝子を同定することができた。非典型的な臨床像が体細胞モザイクやX染色体の異常な不活化と関係していることを明らかにした。特に部分的機能低下型ZAP変異の報告はこれまでになく、ZAP70欠損症の疾患概念ならびにEBV関連リンパ増殖症の疾患概念の広がりに貢献する貴重な発見であった。全エキソーム解析による診断が極めて有用であるとともに、その後の機能解析が需要であることが示され、概ね研究成果は予定通り達成されていると考えられる。

Strategy for Future Research Activity

今後も原因不明の遺伝性リンパ増殖症候群、特にEBV関連リンパ増殖症の患者を対象に全エキソーム解析を行い、新奇遺伝子変異の同定も行う方針である。
またEBV関連リンパ増殖症は予後不良であり、迅速な診断も望まれるので、次世代シークエンサーを利用した候補遺伝子のターゲットシークエンスを開発予定である。
さらにメモリーT細胞にSH2D1A体細胞モザイクを有したXLP1患者さんからiPS細胞の樹立を行う予定である。

Research Products

• [Journal Article] Late-onset combined immunodeficiency with a novel IL2RG mutation and probable revertant somatic mosaicism (2015)
  • Author(s): Okuno Y, Hoshino A, Muramatsu H, Kawasima N, Wang X, Yoshida K, Wada T, Gunji M, Toma T, Kato T, Shiraishi Y, Iwata A, Hori T, Kitoh T, Chiba K, Tanaka H, Sanada M, Takahashi Y, Nonoyama S, Ito M, Miyano S, Ogawa S, Kojima S, Kanegane H
  • Journal Title: J Clin Immunol Volume: 35 Pages: 610-614
  • DOI: 10.1007/s10875-015-0202-0
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Dysgammaglobulinemia Associated With Glu349del, a Hypomorphic XIAP Mutation (2015)
  • Author(s): Nishida N, Yang X, Takasaki I, Imai K, Kato K, Inoue Y, Imamura T, Miyashita R, Kato F, Yamaide A, Mori M, Saito S, Hara J, Adachi Y, Miyawaki T, Kanegane H.
  • Journal Title: J Investig Allergol Clin Immunol Volume: 25 Pages: 205-213
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Reduced Numbers and Proapoptotic Features of Mucosal-associated Invariant T Cells as a Characteristic Finding in Patients with Inflammatory Bowel Disease. (2015)
  • Author(s): Hiejima E, Kawai T, Nakase H, Tsuruyama T, Morimoto T, Yasumi T, Taga T, Kanegane H, Hori M, Ohmori K, Higuchi T, Matsuura M, Yoshino T, Ikeuchi H, Kawada K, Sakai Y, Kitazume MT, Hisamatsu T, Chiba T, Nishikomori R, Heike T.
  • Journal Title: Inflamm Bowel Dis Volume: 21 Pages: 1529-1540
  • DOI: 10.1097/MIB.0000000000000397
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Somatic mosaicism for a NRAS mutation associates with disparate clinical features in RAS-associated leukoproliferative disease: a report of two cases. (2015)
  • Author(s): Shiota M, Yang X, Kubokawa M, Morishima T, Tanaka K, Mikami M, Yoshida K, Kikuchi M, Izawa K, Nishikomori R, Okuno Y, Wang X, Sakaguchi H, Muramatsu H, Kojima S, Miyano S, Ogawa S, Takagi M, Hata D, Kanegane H.
  • Journal Title: J Clin Immunol Volume: 35 Pages: 454-458
  • DOI: 10.1007/s10875-015-0163-3
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] A female patient with incomplete hemophagocytic lymphohistiocytosis caused by a heterozygous XIAP mutation associated with non-random X-chromosome inactivation skewed towards the wild-type XIAP allele. (2015)
  • Author(s): Yang X, Hoshino A, Taga T, Kunitsu T, Ikeda Y, Yasumi T, Yoshida K, Wada T, Miyake K, Kubota T, Okuno Y, Muramatsu H, Adachi Y, Miyano S, Ogawa S, Kojima S, Kanegane H.
  • Journal Title: J Clin Immunol Volume: 35 Pages: 244-248
  • DOI: 10.1007/s10875-015-0144-6
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 10 warning signsから知る原発性免疫不全症 (2016)
  • Author(s): 金兼弘和
  • Organizer: 沖縄小児科学会 第85回例会
  • Place of Presentation: 沖縄県医師会館（南風原市、沖縄県）
  • Year and Date: 2016-03-13
  • Invited
• [Presentation] 免疫不全時の感染症 (2015)
  • Author(s): 金兼弘和
  • Organizer: 第47回日本小児感染症学会
  • Place of Presentation: ザ・セレクトン福島（福島市、福島県）
  • Year and Date: 2015-10-31
• [Presentation] 免疫不全症と感染症 overview (2015)
  • Author(s): 金兼弘和
  • Organizer: 第64回日本感染症学会東日本地方会学術集会
  • Place of Presentation: ロイトン札幌（札幌市、北海道）
  • Year and Date: 2015-10-21
  • Invited
• [Presentation] XLP (X-linked lympho proliferative syndrome) and Epstein-Barr virus infection (2015)
  • Author(s): Kanegane H
  • Organizer: V Simpósio Internacional de Immunodeficiências Primárias—SIDEP
  • Place of Presentation: Belo Horizonte, Brazil
  • Year and Date: 2015-05-22
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] Reemerging subcutaneous immunoglobulin replacement therapy for primary antibody deficiency. (2015)
  • Author(s): Kanegane H
  • Organizer: ASPR Meeting
  • Place of Presentation: 大坂国際会議場（大阪市、大阪府）
  • Year and Date: 2015-04-18
  • Int'l Joint Research / Invited