2014 Fiscal Year Research-status Report
マイクロRNAに着目した多発性嚢胞腎病態生理に基づく疾患特異的治療の開発
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26461618
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| Research Institution | Wakayama Medical University |
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Principal Investigator |
中西 浩一 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (50336880)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉川 徳茂 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (10158412)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 多発性のう胞腎 / マイクロRNA / 分泌 / 増殖 / 線維化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
多発性嚢胞腎（polycystic kidney disease、PKD）は、わが国で最も頻度が高い遺伝性疾患であり、慢性腎不全の主要な原因の一つである。常染色体優性（ADPKD）と常染色体劣性（ARPKD）があり、臨床上の差違にもかかわらず共通の基本的病態生理が存在する。
本研究の目的は、多発性嚢胞腎の複数の基本的病態生理におけるマイクロRNA（miRNA）の関与とその機序を解明し、それらを修飾することによる病態生理に基づいた疾患特異的治療開発のための基礎的知見の獲得、およびそのヒトへの応用のためのモデル動物を用いた治療研究による効果の確認である。
PKDにおける尿細管上皮細胞は、増殖(過形成)・細胞周期異常、分泌(正常では吸収が主である)、細胞外基質異常・線維化を起こし、そのため嚢胞形成・腎不全にいたる。現在、PKDにおけるこれらの基本病態におけるmiRNAの関与およびその機序は不明である。本研究ではmiRNAがPKDの基本病態に関与しているという仮説により、その解明をめざす。
本年度は病態に関与するmiRNAを同定を包括的に検索する目的で、マイクロアレイを導入した。まずマイクロアレイにより腎のmiRNAを検討した。対照と比較して疾患マウスであるCPKマウスにおいて増減があるmiRNAを同定した。2倍、4倍、8倍のレベルで増減を区切り、まず8倍の増減があるmiRNAをreal-time PCRで発現を確認し、マイクロアレイの結果を検証した。実際に有意な差を認める分子を同定することができた。
今後はこれらのmiRNAの生物学的意義を確認するとともに、血液、尿などにおける発現も検討し、疾患活動性の評価における有用性を検討し、バイオマーカーとしての意義も模索する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究の目的は、多発性嚢胞腎の複数の基本的病態生理におけるマイクロRNA（miRNA）の関与とその機序を解明し、それらを修飾することによる病態生理に基づいた疾患特異的治療開発のための基礎的知見の獲得、およびそのヒトへの応用のためのモデル動物を用いた治療研究による効果の確認である。
今年度は病態に関与するmiRNAを同定を包括的に検索する目的で、マイクロアレイを導入した。まずマイクロアレイにより腎のmiRNAを検討した。対照と比較して疾患マウスであるCPKマウスにおいて増減があるmiRNAを同定した。2倍、4倍、8倍のレベルで増減を区切り、まず8倍の増減があるmiRNAをreal-time PCRで発現を確認し、マイクロアレイの結果を検証した。実際に有意な差を認める分子を同定することができた。
当初の計画では病態の関与が既知のmiRNAの解析を中心に計画したが、包括的検討によりさらなるmiRNAの検索を実施することにより、より効果的な研究をめざす。
さらに、単なるmiRNA病態関与のみでなく、最終的にはその修飾による疾患治療を念頭に置いているが、そこへの到達は困難も予想され、得られた知見の有効利用の観点から、血液や尿などにおける検討も併せて実施し、バイオマーカーとしての意義も模索することを検討している。
以上の理由により、本年度の研究進捗状況は、おおむね順調に伸展していると考える。
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| Strategy for Future Research Activity |
本研究の目的は、多発性嚢胞腎の複数の基本的病態生理におけるマイクロRNA（miRNA）の関与とその機序を解明し、それらを修飾することによる病態生理に基づいた疾患特異的治療開発のための基礎的知見の獲得、およびそのヒトへの応用のためのモデル動物を用いた治療研究による効果の確認である。
今年度は病態に関与するmiRNAを同定を包括的に検索する目的で、マイクロアレイを導入した。まずマイクロアレイにより腎のmiRNAを検討した。対照と比較して疾患マウスであるCPKマウスにおいて増減があるmiRNAを同定した。2倍、4倍、8倍のレベルで増減を区切り、まず8倍の増減があるmiRNAをreal-time PCRで発現を確認し、マイクロアレイの結果を検証した。実際に有意な差を認める分子を同定することができた。
当初の計画では病態の関与が既知のmiRNAの解析を中心に計画したが、包括的検討によりさらなるmiRNAの検索を実施することにより、より効果的な研究をめざす。
さらに、単なるmiRNA病態関与のみでなく、最終的にはその修飾による疾患治療を念頭に置いているが、そこへの到達は困難も予想され、得られた知見の有効利用の観点から、血液や尿などにおける検討も併せて実施し、バイオマーカーとしての意義も模索することを検討している。
今後の重要な点は、変化が同定されたmiRNAのPKDにおける個々の病態への関与の検証であり、miRNAの生体での修飾が鍵となる。生体での検討が困難な場合、培養細胞等を用いた実験によりまずデータを得ることも重要と考える。最終的目的達成のためには複数のステップにおいて、最良の方法を模索する必要があり困難も予測されるが、根気強く研究を実施し、少しずつでも確実に進めていく。
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| Causes of Carryover |
当初の計画では病態の関与が既知のmiRNAの解析を中心に計画したが、包括的検討によりさらなるmiRNAの検索を実施することにより、より効果的な研究をめざすため、マイクロアレイを導入した。そのため研究費の配分に変更が生じた。
研究室全体の共用の試薬等は教室独自の研究費でまかなう事ができた。初年度ということもあり、研究推進のための情報収集や意見交換が重要であり、旅費関係が増えた。
現時点での当初購入予定の器機の購入は予算の配分の変更などにより現実的に困難であり、日進月歩の器機の進歩、価格の改定いよりより現実に即した形で購入を検討する必要がある。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
本研究の目的を達成するために、効率的に研究費を使用し、限られた金額の中で最大限の効果を生み出せるように配慮する。
研究室全体の共用の試薬等は教室独自の研究費でまかなう事ができればそちらで支出し、できるだけ効率的に本研究費を使用する。来年度以降も、研究推進のための情報収集や意見交換が重要であり、旅費関係の支出が見込まれる。
当初購入予定の器機の購入は予算の配分の変更などにより現実的に困難であり、日進月歩の器機の進歩、価格の改定いよりより現実に即した形で購入を検討していく。
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[Journal Article] A multicenter randomized trial indicates initial prednisolone treatment for childhood nephrotic syndrome for two months is not inferior to six-month treatment2015
Author(s)
Yoshikawa N, Nakanishi K, Sako M, Oba MS, Mori R, Ota E, Ishikura K, Hataya H, Honda M, Ito S, Shima Y, Kaito H, Nozu K, Nakamura H, Igarashi T, Ohashi Y, Iijima K
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Journal Title
Kidney Int
Volume: 87
Pages: 225-232
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Renal biopsy criterion in idiopathic nephrotic syndrome with microscopic hematuria at onset2015
Author(s)
Hama T, Nakanishi K, Shima Y, Sato M, Mukaiyama H, Togawa H, Hamahira K, Tanaka R, Kaito H, Nozu K, Iijima K, Yoshikawa N
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Journal Title
Pediatr Nephrol
Volume: 30
Pages: 445-450
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Cyclosporine C2 monitoring for the treatment of frequently relapsing nephrotic syndrome in children: a multicenter randomized phase Ⅱtrial2014
Author(s)
Iijima K, Sako M, Oba MS, Ito S, Hataya H, Tanaka R, Ohwada Y, Kamei K, Ishikura K, Yata N, Nozu K, Honda M, Nakamura H, Nagata M, Ohashi Y, Nakanishi K, Yoshikawa N
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Journal Title
Clin J Am Soc Nephrol
Volume: 9
Pages: 271-278
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Milder clinical aspects of X-linked Alport syndrome in men positive for the collagen IV α5 chain2014
Author(s)
Hashimura Y, Nozu K, Kaito H, Nakanishi K, Fu XJ, Ohtsubo H, Hashimoto F, Oka M, Ninchoji T, Ishimori S, Morisada N, Matsunoshita N, Kamiyoshi N, Yoshikawa N, Iijima K
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Journal Title
Kidney Int
Volume: 85
Pages: 1208-1213
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Rituximab for childhood-onset, complicated, frequently relapsing nephrotic syndrome or steroid-dependent nephrotic syndrome: A multicentre, double-blind, randomised, placebo-controlled trial2014
Author(s)
Iijima K, Sako M, Nozu K, Mori R, Tsuchida N, Kamei K, Miura K, Aya K, Nakanishi K, Ohtomo Y, Takahashi S, Tanaka R, Kaito H, Nakamura H, Ishikura K, Ito S, Ohashi Y
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Journal Title
Lancet
Volume: 384(9950)
Pages: 1273-1281
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Natural history of genetically proven autosomal recessive Alport syndrome2014
Author(s)
Oka M, Nozu K, Kaito H, Fu XJ, Nakanishi K, Hashimura Y, Morisada N, Yan K, Matsuo M, Yoshikawa N, Vorechovsky I, Iijima K
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Journal Title
Pediatr Nephrol
Volume: 29
Pages: 1535-1544
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Smad3 gene deletion ameliorates cyst formation and interstitial fibrosis in cpk mouse, a model of ARPKD2014
Author(s)
Hama T, Nakanishi K, Mukaiyama H, Togawa H, Sato M, Shima Y, Miyajima M, Nozu K, Nagao S, Takahashi H, Iijima K, Yoshikawa N
Organizer
47th Annual Meeting of the American Society of Nephrology
Place of Presentation
Philadelphia, USA
Year and Date
2014-11-11 – 2014-11-16
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