2014 Fiscal Year Research-status Report
炎症性皮膚疾患ケラチノサイトにおけるエピゲノミクス異常の動的変化の解析
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26461657
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
小川 靖 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (10567754)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 皮膚科学 / 乾癬 / アトピー性皮膚炎 / エピジェネティクス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、病変の誘導が可能な、乾癬モデルマウス、アトピー性皮膚炎モデルマウスを用いて、皮膚病変の形成過程による遺伝子発現変化と、それに伴うヒストン修飾の変化を解析することで、炎症性皮膚疾患における表皮ケラチノサイト(KC)のエピジェネティクス異常による病態形成機構を解析する事を目的とする。この為に必要な実験系の作成をH26年度に行った。具体的には、以下の３つのモデル系を確立した。
（１）乾癬モデルマウスとして、imiquimod塗布モデルを作成した。適切な前処置、塗布量、塗布期間について検討を行い、条件を確立した。
（２）乾癬モデルマウスとして、IL-23注射モデルを作成した。imiquimod塗布による乾癬モデルとIL-23注射モデルマウスを比較し、費用と簡便性の点から前者を今後の研究に用いる事を決定した。
（３）アトピー性皮膚炎モデルとして、NC/Ngaマウスによる疾患再原型を作成した。NC/Ngaマウスによる表現型の発現は、飼養環境の湿度、清潔度により異なる為、我々の研究体制での条件検討を行い、ダニ抗原含有軟膏塗布により病変を惹起する系を今後の研究に飼養する事を決定した。また、flaky mouseは凍結胚を購入したが、個体作成を行うには予算が不足した為、 NCマウスによるアトピー性皮膚炎モデルの作成を優先して施行した。
これらのマウスから初代ケラチノサイト培養を行う手技について、検討を行い、条件を設定している。また、表皮からtotal RNAを採取し、IL-6、IL-23、S100A7、TSLP等の発現の変化を定量RT-PCRにより確認する実験系を作成した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究協力者のうち、本実験を中心的に担当していた大学院生が疾患の為、療養に入り、その後急逝した。この為、実験の予定、引き継ぎを適切に行うことができず、全体として、進行が遅れた。
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| Strategy for Future Research Activity |
当初の計画通り、H27年度、H28年度の研究計画を遂行する。
H26年に遅れていた、発現プロファイル解析を行う。
H27年度は当初の計画に沿って、疾患モデルマウスからの免疫沈降アッセイを樹立し、疾患関連遺伝子及び炎症性サイトカインのプロモーター領域におけるエピジェネティックな変化を解析する。
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| Causes of Carryover |
研究協力者のうち、本実験を中心的に担当していた大学院生が疾患の為、療養に入り、その後急逝した。この為、実験の予定、引き継ぎを適切に行うことができず、全体として、進行が遅れた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
当初の計画通り、H27年度、H28年度の研究計画を遂行する。
H26年に遅れていた、発現プロファイル解析として、H27年度は当初の計画に沿って、疾患モデルマウスからの免疫沈降アッセイを施行し、疾患関連遺伝子及び炎症性サイトカインのプロモーター領域におけるエピジェネティックな変化を解析する。
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