2015 Fiscal Year Research-status Report
迅速な肝細胞複合シート作製技術を基盤とした急性肝不全治療
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26461916
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
江口 晋 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (80404218)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山之内 孝彰 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 講師 (10448508)
堺 裕輔 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 助教 (10608904)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 急性肝不全 / 肝細胞 / 細胞シート / 再生医療 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
急性肝不全の治療は急を要し、複雑多岐な肝臓機能をサポートできる技術の確立が望まれている。当科では、肝臓移植に代わる新しい肝再生医療として肝細胞複合シートを開発し、皮下肝組織の構築に取り組んできた。本研究では、急性肝不全の治療を可能にする、迅速な肝細胞複合シート作製技術の確立を目的とする。
平成27年度は、「1. 肝細胞複合シートの迅速作製」、「2. 迅速作製肝細胞複合シートの皮下移植効果」、「3. 急性肝不全モデルの確立」を行い、以下の成果を得た。
1. 肝細胞複合シートの迅速作製： 35mm径の温度応答性培養皿（UpCell; セルシード社）にFBSをコーティングし、1.5×10^6 cells/dish以上の密度でヒト線維芽細胞を培養することで安定的にコンフルエント化することを実証した。支持細胞上に初代肝細胞を播種すると迅速に接着し、計4時間以内にシートとして回収可能であった。また、あらかじめ線維芽細胞と初代肝細胞を混合して播種すると、播種後2時間以内にコンフルエント化したが、安定的な回収可能は困難であった（Sakai Y, Eguchi S, et al., Data Brief, 2015）。
2. 迅速作製肝細胞複合シートの皮下移植効果： 迅速作製した肝細胞複合シートを免疫不全マウスの皮下に移植すると、高い機能発現が見られた。一方、4日間培養した従来手法で作製した肝細胞複合シートの移植効果と比較したところやや低値であったものの、肝細胞のみと比較すると高値であった。
3. 急性肝不全モデルの確立： ICRマウス（6週齢）を90％部分肝切除すると72時間後生存率は33％であり、術後急性肝不全モデルとして有望であることを明らかにした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
急性肝不全の治療を可能にする迅速な肝細胞複合シート作製技術の確立を目的とし、本年度は迅速作製法の確立、「1. 肝細胞複合シートの迅速作製」、「2. 迅速作製肝細胞複合シートの皮下移植効果」、「3. 急性肝不全モデルの確立」を行った。昨年度の目標はほぼ達成しており、おおむね順調に進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
凍結保存の溶媒組成の検討を行い、すぐに利用することのできる凍結肝細胞のストックを行う。また、迅速作製した肝細胞複合シートを免疫不全マウスの皮下に移植し、組織形成や機能発現への効果を明らかにする。術後急性肝不全モデルマウスに肝細胞複合シートを皮下移植し、生存への効果を明らかにする。
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[Journal Article] Vascularized subcutaneous human liver tissue from engineered hepatocyte/fibroblast sheets in mice2015
Author(s)
Yusuke Sakai, Kosho Yamanouchi, Kazuo Ohashi, Makiko Koike, Rie Utoh, Hideko Hasegawa, Izumi Muraoka, Takashi Suematsu, Akihiko Soyama, Masaaki Hidaka, Mitsuhisa Takatsuki, Tamotsu Kuroki, Susumu Eguchi
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Journal Title
Biomaterials
Volume: 65
Pages: 66-75
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Efficacy of multi-layered hepatocyte sheet transplantation for radiation-induced liver damage and partial hepatectomy in a rat model2015
Author(s)
Zhassulan Baimakhanov, Kosho Yamanouchi, Yusuke Sakai, Makiko Koike, Akihiko Soyama, Masaaki Hidaka, Mitsuhisa Takatsuki, Fumihiko Fujita, Kengo Kanetaka, Tamotsu Kuroki, Susumu Eguchi
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Journal Title
Cell Transplantation
Volume: 25
Pages: 549-558
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] Efficacy of multi-layered hepatocyte sheet transplantation for radiation-induced liver damage and partial hepatectomy in a rat model2015
Author(s)
Zhassulan Baimakhanov, Kosho Yamanouchi, Yusuke Sakai, Akihiko Soyama, Masaaki Hidaka, Mitsuhisa Takatsuki, Fumihiko Fujita, Kengo Kanetaka, Tamotsu Kuroki, Susumu Eguchi
Organizer
Clinical Congress 2015, American College of Surgeons
Place of Presentation
Chicago, IL, USA
Year and Date
2015-10-04 – 2015-10-08
Int'l Joint Research
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